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目的: 1、通过对人附红细胞体重度感染患者的血液学、血液生化学等各项指标的监测,进一步了解附红细胞体重度感染对机能代谢的影响;进行溶血项目的检查判断附红细胞体感染引起的贫血原因和类型;测定血浆中的IL-1、IL-17和TNF的变化,探讨发热产生的机理;通过对NO、SOD、MDA指标的检测观察附红细胞体对机体抗氧化能力的影响。 2、对人附红细胞体重度感染患者的血涂片,进行多种方法的染色,应用光学显微镜和透射电镜进一步观察人附红体的各种形态,附着形式和寄生特点;以及红细胞膜结构破坏情况;对研究附红体的附着侵袭力和对红细胞膜上的蛋白质功能影响提供参考。 3、通过对患者血浆中的CD35、CD58、CD59免疫相关因子的测定,观察附红细胞体对红细胞免疫功能的影响。方法采集内蒙古国际蒙医院患者的血,用光学显微镜镜检、透射电镜观察以及PCR检测方法,鉴定并筛选出60名重度感染的患者,测定其血象、血生化指标,及溶血项目检测进行研究。并与30例健康人作比较,实验数据用均数±标准差(x± s)表示,应用SPSS13.0统计学软件进行统计学分析,两组间比较采用两独立样本T检验,以 P<0.05为差异有统计学意义。 结果: 1、60例人附红细胞体重度感染患者中,有29例有贫血症状,按临床诊断排除因基础疾病引起的贫血4例,其余25例贫血与附红细胞体感染密切相关。并对25例贫血患者项目检查显示部分患者红细胞渗透脆性增加;冷凝集试验效价上升,尿含铁血黄素实验阳性,尿血红蛋白定性实验阳性,血片显示中晚幼红出现及网织红细胞数增高,血浆中游血红蛋白变化不大,另外有6例患者肝功能异常。 2、被检患者中IL-1、IL-17和TNF含量上升、SOD活性下降,NO、MDA含量升高,血浆中CD35、CD58、CD59含量升高。 3、瑞氏、姬姆萨染色的血涂片,在光学显微镜1000倍油镜下观察,可见附红细胞体主要寄生在成熟红细胞表面及血浆中,形态呈多样性,着色不同,且具有折光性,寄生在红细胞表面的附红细胞体其排列形式显示多样性,有点状、簇状、花环状、串珠状等。此外,在粒细胞、淋巴细胞偶见少量附红体寄生。透射电镜下可观察到附红细胞体寄生在红细胞表面,附红细胞体与红细胞之间有纤丝连接,红细胞膜出现凹陷。活体压片镜检可以观察到附红细胞体附着于红细胞表面,感染严重的红细胞失去球形立体形态,如布满突起的蓖麻球或呈现菠萝状,边缘不整而呈轮状、星芒状、不规则多边形等。有的游离在血浆中呈不断变化的星状闪光小体,在血浆中不断地摆动、翻滚。 4、根据已有的附红细胞体特异性片段设计引物成功地扩增得到432bp的PCR产物。 结论: 1、采用血涂片染色镜检,进行瑞氏、姬姆萨染色,在光学显微镜1000倍油镜下检测人附红细胞体,操作简便,适用性强,仍是目前临床检验附红细胞体的基本方法。采用 PCR检测和透射电镜检测方法可以特异性检测出附红细胞体。 2、人附红细胞体重度感染引起机体贫血,从检测指标显示这种贫血类型是溶血性贫血,从发病原因分析即有血管内溶血,也有血管外溶血以及存在自体免疫性溶血性贫血,为临床治疗提供理论基础。 3、对红细胞免疫相关因子的检测,人感染附红细胞体后,机体红细胞免疫功能受到影响。