乌苏里瓦韦化学成分及其生物活性的研究

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乌苏里瓦韦为蕨类水龙骨科(Polypodiaceae)瓦韦属(Lepisorus)植物乌苏里瓦韦[Lepisorus Ussuriensis(Regel et Maack)Ching]的全草。具有清热解毒功效,民间广泛用于治疗小便不利、尿血、水肿、咽喉肿痛等病症。有关其化学成分和生物活性的研究报道较少,为进一步阐明其化学成分,筛选其生物活性,本论文对吉林产乌苏里瓦韦药用植物开展了以下几个方面的研究:1、首次采用ICP-MS新技术测定了乌苏里瓦韦中人体必需微量元素的含量,其中Mn,Zn,Cr,Ni,Cu,V,Mo,Se,Co,Sn等元素的质量分数分别为213.70,48.63,13.89,6.54,6.50,2.57,1.23,0.58,0.60,0.30μg/g。结果表明,该植物中含较丰富的Mn,Zn,Cr,Ni,Cu,V等元素。填补了该植物微量元素研究的空白。2、首次采用响应面法对乌苏里瓦韦总黄酮和总酚酸的提取工艺进行了优化,获得的最佳提取条件为:乙醇体积分数为80%、提取次数3次、料液比为1:30。所得提取物中总黄酮、总酚酸的含量分别为15.8%和8.8%。为进一步的化学成分及生物活性研究提供原料。3、采用柱色谱和液相色谱等方法,从乌苏里瓦韦80%乙醇提取物中分离得到18个化合物,采用HR-MS、NMR等波谱技术鉴定了其中15个化合物的结构,分别为:槲皮素3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(1)、槲皮素(2)、染料木素(3)、藁本内酯(4)、(3S)-6,8-二羟基-3-苯基-3,4-二氢异香豆素(5)、菠菜甾醇(6)、桉叶素(7)、咖啡酸(8)、咖啡酸乙酯(9)、β-谷甾醇(10)、邻苯二甲酸-二(2-乙基-己基)酯(11)、邻苯二甲酸正辛酯(12)、3,27-二甲基-二十七烷(13)、7-羟基香豆素(14)以及绿原酸(15)。其中,化合物3~9、11~14等11个化合物均为首次从瓦韦属植物中分离鉴定。4、首次采用氨水引咳法、气管酚红排泌法等经典模型研究了乌苏里瓦韦的镇咳和祛痰作用,并通过气管注射脂多糖造成急性炎症模型以探讨其作用机制。结果表明,乌苏里瓦韦可明显延长小鼠咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,增加气管酚红排泌量,具有较好的镇咳、祛痰活性;可能是通过降低血清炎性因子IL-6和IL-1β以及TNF-α的含量而发挥药理作用。5、首次利用UPLC-Q/TOF-MS结合多元统计分析,辨识了灌胃给予乌苏里瓦韦小鼠体内的血中移行成分,为阐明其药效物质基础提供科学数据。从健康鼠中鉴定了原型入血成分22个,从炎性病理鼠中鉴定了原型入血成分31个,二者的血中移行成分存在一定差异。从炎性病理鼠的血中移行成分中发现了木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异牡荆素以及木通苯乙醇苷B等3个含量较高的入血成分,而在健康鼠血清中未检测出,推测该3种成分与与抗炎药效紧密相关。综上,本论文对乌苏里瓦韦的化学成分,镇咳祛痰生物活性、作用机制及入血成分进行了深入研究,完善了其化学成分研究,扩大了药用范围,为进一步的开发与利用乌苏里瓦韦提供了科学数据和理论基础。
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