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目的:观察吗啡对大鼠肠缺血/再灌注肺损伤的的保护作用,并探讨其作用机制,为扩展其临床新用途提供实验依据。方法:1实验分组及动物模型制备雄性清洁级wistar大鼠32只,月龄3～3.5月,体重250～300g(河北医科大学实验动物中心提供)。随机分为4组,每组8只:假手术组(S组),缺血再灌注组(I/R),吗啡组(M组),纳洛酮组(N组)。S组:暴露肠系膜上动脉(SMA),观察3小时;I/R组:暴露SMA,动脉夹夹闭1小时,再灌注2小时;M组:缺血前15分钟颈静脉输注吗啡300μg/㎏,其他同I/R组;N组:输注吗啡前10分钟给予纳洛酮3㎎?㎏,其他同M组。2检测指标及检测方法2.1各组动物的体重、月龄2.2酶联免疫法测定大鼠血浆中TNF-α的含量颈静脉抽血4℃,10000r/min离心,5min后保留血浆,采用双夹心ELISA法,按照试剂盒说明进行,结果以每克蛋白所含TNF-α含量表示。2.3电子显微镜下观察肺组织的超微结构变化取上述大鼠右肺上叶切取1㎜×1㎜×1㎜的组织块,于4℃4%戊二醛中固定1h以上,送电镜室在透射电镜下观察肺组织的超微结构。2.4肺组织含水率大鼠再灌注2小时,心脏抽血处死后取右肺中叶,吸干称湿重。将该肺组织置于60℃烤箱中烤48小时,称干重。肺含水率=(湿重-干重)/湿重×100%2.5光镜下观察肺组织的病理改变再灌注2小时后,心脏抽血处死大鼠,取右肺下叶,置于4℅多聚甲醛中固定,切片HE染色,在200倍光镜下观察肺组织的病理改变。2.6免疫组织化学测定肺组织NF-κB的变化取右肺下叶,切片制作方法同光镜标本,切片与一抗、二抗和显色剂作用,显色后在400倍光镜下观察肺组织NF-κB的阳性表达结果。2.7免疫组织化学测定肺组织ICAM-I的变化用上述标本再做切片,与一抗、二抗和显色剂作用,显色后在400倍光镜下观察肺组织ICAM-I的阳性表达结果。结果:1各组动物的体重、月龄差异均无统计学意义(P>0.05)2酶联免疫法测定大鼠血浆中TNF-α的含量与S组比较,I/R组、M、N组血浆中TNF-α的含量明显增高(P<0.05);与I/R组比较,M组血浆中TNF-α的含量明显减低(P<0.05),N组与之差别不大,无统计学意义(P>0.05)。3电子显微镜下观察肺组织的超微结构变化S组:二型细胞,细胞器,线粒体基本正常,气血屏障基膜很清晰;I/R组:肺泡二型细胞的板层小体及微绒毛数量明显减少。肺泡腔里有大量红细胞,还有脱落的上皮细胞核,胞质。大量胶原纤维增生,局部有肺不张;M组:二型细胞局部放大,基本正常.气血屏障3层结构很清晰,有部分基膜稍变厚,不均匀。线粒体有轻度损伤;N组:肺泡二型细胞微绒毛短小,板层小体减少,细胞器减少,二型细胞变化明显,核周间隙扩张,线粒体结构髓样化,气血屏障3层结构模糊不清,肺胞腔内有出血。4肺组织含水率与S组比较,I/R组、N组肺组织含水率明显增加(P<0.05),M组肺组织含水率增加不明显,无统计学意义(P>0.05);与I/R组比较,M组肺组织含水率明显减少(P<0.05),N组减少不明显,无统计学意义(P>0.05);M组肺组织含水率较N组明显减少(P<0.05)。5光镜下观察肺组织的病理改变S组肺泡结构清晰,肺间质可见PMN浸润,无肺泡出血;I/R组肺泡壁增厚,肺泡内有大量渗出及扩张不均匀,间质和肺泡腔内有大量PMN浸润,肺泡有出血;M组肺泡的病理改变较I/R组明显减轻,肺泡结构胶清晰,中性粒细胞浸润减少;N组肺泡的病理改变较M组为重。6免疫组织化学测定NF-ΚB的变化与S组比较,I/R组、N组肺组织NF-κB的免疫阳性细胞数明显增加(P<0.05),M组肺组织NF-κB的免疫阳性细胞数增加不明显,无统计学意义(P>0.05);与I/R组比较,M组肺组织NF-κB的免疫阳性细胞数明显减少(P<0.05),N组减少不明显,无统计学意义(P>0.05);M组肺组织NF-κB的免疫阳性细胞数较N组明显减少(P<0.05)。7免疫组织化学测定ICAM-I的变化与S组比较,I/R组、N组肺组织ICAM-I的免疫阳性细胞数明显增加(P<0.05),M组肺组织ICAM-I的免疫阳性细胞数增加不明显,无统计学意义(P>0.05);与I/R组比较,M组肺组织ICAM-I的免疫阳性细胞数明显减少(P<0.05),N组减少不明显,无统计学意义(P>0.05);M组肺组织ICAM-I的免疫阳性细胞数较N组明显减少(P<0.05)。结论:吗啡预处理对大鼠肠缺血再灌注导致的肺损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与降低NF-κB的表达,从而减少血浆TNF-α及肺组织ICAM-I的含量有关,这种调节可能与阿片受体有关。