由于绝大多数肺癌患者在晚期才能确诊,所以肺癌是目前世界上死亡率最高的癌症之一,其中NSCLC约占肺癌的80-85%。因此,如何寻找特异性肿瘤标志蛋白,是目前关注的焦点。为了筛选NSCLC肿瘤中差异蛋白的表达我们采用一种革新的蛋白质组学技术-Pathway Array技术(蛋白通路芯片技术),该方法是在传统的Western-blot的基础上改良进行的,能够应用一份蛋白标本同时筛选鉴定上千种磷酸化或非磷酸化蛋白,具有高度的敏感性、特异性、准确性及可重复性等特点。在本研究中,选取39例NSCLC肿瘤组织与癌旁组织,检测38种非磷酸化的抗体蛋白,结果共发现21种蛋白有表达(55%),其中12种(32%)蛋白差异表达在1.5倍以上(p<0.05),表达增加的蛋白有14-3-3-β、β-catenin、Cdc2 p34、Cdk2、Cdk4、Hsp90、Notch 4、XIAP、PCNA,下降的有Cyclin B1、cPKCα、cdc 25C。上述蛋白与肿瘤细胞的细胞循环、细胞凋亡、细胞周期调整、DNA修复、细胞增殖、细胞分化、信号转导等有关。凋亡常与肿瘤的发生、发展、预后、甚至肿瘤的耐药具有密切的关系。最近研究表明,凋亡抑制蛋白(IAPs)是细胞内一类最具保守性的独特的抗凋亡蛋白家族。XIAP是凋亡抑制蛋白家族中最具效力的蛋白,它能有效抑制凋亡终末途径Caspase,从而抑制细胞的凋亡。国内外多项研究表明,XIAP在多种肿瘤中表达升高,其表达水平与肿瘤发生、预后及放、化疗敏感性明显相关。本研究在上面Pathway Array的基础上,选择在NSCLC肿瘤组织和癌旁组织间具有差异表达的蛋白之一—凋亡抑制蛋白XIAP做进一步的研究和分析。在39例NSCLC病例中62%(24/39)XIAP蛋白表达阳性,38%(15/39)XIAP蛋白无表达。XIAP蛋白阳性表达的肿瘤组织中蛋白的相对表达量OD值为0.1604±0.20334,癌旁组织中OD值为0.0361±0.05094,肿瘤组织与癌旁组织间有明显统计学意义(p<0.01)。在研究XIAP与临床资料间的关系发现,在39例NSCLC肿瘤组织中XIAP蛋白表达水平与患者的年龄、性别、吸烟史及淋巴结转移无关(P>0.05),与肿瘤的临床分期及病理分级程度有关(P<0.05)。本研究还应用Pathway Array技术检测5种肺癌细胞系中XIAP的表达情况,发现肺癌细胞系中XIAP的表达水平明显高于对照组,其中A549细胞系是NSCLC细胞系中XIAP表达量最高的。为进一步分析XIAP在肿瘤化疗中的作用,首先应用MTT检测肿瘤细胞的抑制率,细胞株A549在不同浓度DDP分别作用24h、48h后发现,当DDP为低药物浓度(<10 ug/ml)时,细胞的抑制率呈药物浓度和时间依赖性,但当高药物浓度(≥10 ug/ml)时,细胞的抑制率则与药物浓度和作用时间无明显关系(p<0.05)。应用SYBR Green实时定量PCR技术检测肿瘤细胞中XIAP mRNA的变化情况发现,在低药物浓度(<10 ug/ml)时,XIAP mRNA表达增加,而高药物浓度(≥10 ug/ml),DDP则引起大量细胞坏死,从而导致XIAP mRNA的表达减少。在低药物浓度时,XIAP mRNA表达增高是由于DDP诱导产生的,引起细胞内凋亡抑制,导致肿瘤细胞耐药。