南方根结线虫生防细菌的筛选及影响因子研究

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南方根结线虫(Meloidogyne incognita)严重危害世界农业生产,传统的化学防治既危害人类健康又污染环境。植物内生细菌(Endophytic bacteria)因其独特的生态优势在生物防治领域具有广阔的应用前景,但有生防活性的菌株在实际应用中易受环境影响导致防效降低或失效。本实验的目的是筛选能够高效防治南方根结线虫的内生细菌并研究其定殖和防效的影响因子,为利用植物内生细菌防治南方根结线虫提供理论依据。南方根结线虫生防菌的筛选采用水解明胶活性菌株的初筛以及发酵上清液和菌悬液杀线虫活性的复筛,进一步通过盆栽番茄人工接种内生菌和线虫的方法验证;对具有生防潜力的菌株研究其对番茄生长的影响及在番茄根部的定殖动态;选择盆栽防效高,促生效果好,定殖能力强的菌株制成固体菌剂,在病圃中栽培番茄调查固体菌剂对根结线虫的防治效果及对番茄生长和产量的影响;采用形态观察和16S rRNA基因测序法鉴定菌种。结果从59株植物内生细菌中筛选得到19株能够水解明胶的菌株,其中H1、SHI和E62的水解明胶能力最强;ZC13的发酵上清液和Q1的菌悬液对根结线虫二龄幼虫(J2)的校正致死率最高,分别为81.11%和52.76%;盆栽防效最高是Q1、H1、LAI和SHI,卵块抑制率和根结抑制率均在68%以上且都能促进番茄生长;Q1和SHI能有效在番茄根内定殖,定殖量维持在104 cfu/g,Q1、H1、LA1和SHI都能在根际土壤中定殖,定殖量维持在106cfu/g,Q1在根内和根际土壤中的定殖量显著高于其他菌株;在病圃中Q1的菌剂能使番茄根内的线虫数降低68.54%并促进番茄生长;经鉴定Q1为球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus),H1为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),LA1为温哥华假单胞菌(Pseudomonas vancouverensis),SHI 为蜡样芽孢杆菌(B.cereus)。采用盆栽番茄人工接种法研究Q1定殖与防效的影响因子。首先研究Q1菌株的接种浓度和接种方法对Q1定殖和根结线虫防效的影响,然后选择最适的接种浓度和接种方法研究土壤含水量、土壤pH、土壤质地、肥料和金属离子等因子对Q1的影响。结果表明增大接种浓度,伤根接种,维持土壤30%的含水量有利于Q1在番茄根内定殖;定殖数量增加能提高Q1的防效;增大接种浓度,伤根接种以及含水量30%的土壤、中性土壤、粘壤土、除钾肥以外的化肥、Ca2+有利于提高Q1的防效。植物内生细菌Q1对防治南方根结线虫具有巨大潜力,定殖过程不易受环境影响,按其特点合理应用可以提高对南方根结线虫的防效。
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