【摘 要】
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目的明确小豆蔻明（Cardamonin,CAR）诱导卵巢癌细胞凋亡、抑制细胞增殖的作用及作用机制是否与降低Raptor蛋白表达抑制谷氨酰胺酶（glutaminase,GLS）蛋白表达有关。方法1细胞培养用含10%胎牛血清、100 mg·m L-1链霉素及100 U·m L-1青霉素的Mc Coy’s 5A、RPMI1640培养基在37℃、5%CO2条件下,分别培养卵巢癌SKOV3细胞、Raptor
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目的明确小豆蔻明（Cardamonin,CAR）诱导卵巢癌细胞凋亡、抑制细胞增殖的作用及作用机制是否与降低Raptor蛋白表达抑制谷氨酰胺酶（glutaminase,GLS）蛋白表达有关。方法1细胞培养用含10%胎牛血清、100 mg·m L-1链霉素及100 U·m L-1青霉素的Mc Coy’s 5A、RPMI1640培养基在37℃、5%CO2条件下,分别培养卵巢癌SKOV3细胞、Raptor敲除的SKOV3细胞、卵巢癌A2780细胞。2主要指标及测定方法2.1 CCK8检测细胞存活;2.2 Western Blotting法检测蛋白表达;2.3流式细胞术检测细胞凋亡细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平。结果1 CAR浓度依赖性抑制卵巢癌SKOV3和A2780细胞增殖（P<0.05）,诱导SKOV3细胞凋亡（P<0.05）,促进细胞凋亡蛋白Cleaved caspase 3和Cleaved caspase9的表达（P<0.05）;CAR浓度依赖性增加SKOV3细胞内ROS的生成（P<0.05）,ROS清除剂NAC可逆转CAR抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖（P<0.05）;2谷氨酰胺浓度依赖性促进SKOV3和A2780细胞增殖,且SKOV3细胞对谷氨酰胺依赖程度更高（P<0.05）;CAR可抑制谷氨酰胺促进细胞增殖的作用（P<0.05）;3 CAR抑制SKOV3细胞GLS蛋白表达,呈浓度依赖性（P<0.05）;4 CAR抑制Raptor蛋白表达,抑制mTOR及其下游蛋白S6K1的磷酸化（P<0.05）;5 Raptor敲除的SKOV3细胞Raptor、p-S6K1及GLS蛋白表达降低,CAR对其p-S6K1和GLS蛋白表达无明显影响（P<0.05）。结论CAR对卵巢癌细胞具有抑制增殖、诱导凋亡、促进ROS生成的作用,其机制与抑制Raptor蛋白表达降低GLS蛋白表达相关。
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