MMP-2、TIMP-2、MMP-9与急性白血病关系的研究

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目的:检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织特异性抑制因子-2(TIMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在急性白血病(AL)患者骨髓上清液中的浓度及骨髓单个核细胞MMP-2、TIMP-2 mRNA的表达,并探讨其与急性白血病临床发生、发展和髓外浸润的关系。方法:(1)收集82例AL患者和正常人骨髓标本,其中初治组35例, (初治组中急性非淋巴细胞白血病ANLL患者25例,急性淋巴细胞白血病ALL患者10例),复发组12例,缓解组27例,正常对照组8例,采用ELISA方法测定各组标本中MMP-2、TIMP-2、MMP-9浓度,并与患者髓外浸润发生、骨髓幼稚细胞、外周血幼稚白细胞计数、外周血白细胞、治疗效果等进行统计学分析。(2)对47例初治、复发患者,根据研究对象的病情分为ALL有髓外浸润组、ANLL有髓外浸润组、ALL无髓外浸润组、ANLL无髓外浸润组,分离骨髓中的单个核细胞,提取RNA后用荧光定量PCR方法检测MMP-2、TIMP-2及(3-Actin mRNA的表达,并分析所测得的△Ct值。结果:(1)MMP-2在初治组、复发组及缓解组中的浓度均显著高于正常对照组,与正常对照组相比有统计学意义(P<0.05);在初治组、复发组及缓解组之间并无统计学意义(P>0.05)。TIMP-2在初治组、复发组、缓解组及正常对照组中的浓度在各组之间均无统计学差异(P>0.05)。MMP-9在初治组、复发组、缓解组中的浓度均显著低于正常对照组,有统计学差异(P<0.05)。35例初治患者中ALL患者MMP-2浓度显著高于ANLL患者及正常组对照组(P<0.05),后两者间无统计学差异(P>0.05);初治的ALL患者TIMP-2显著高于ANLL患者及正常组(P<0.05),但在ANLL患者及正常组间并无统计学差异(P>0.05);在初治患者中,尽管ALL患者MMP-9浓度明显高于ANLL患者,但两者并无统计学差异;初治的ANLL及ALL患者MMP-9的浓度均显著低于正常对照组(P<0.05)。(2)47例初治及复发的AL患者按有髓外浸润的ANLL,无髓外浸润的ANLL,有髓外浸润的ALL,无髓外浸润的ALL分为四组,有髓外浸润的ALL患者骨髓上清中MMP-2及TIMP-2浓度明显升高(P<0.05),与其它三组有显著的统计学差异;而MMP-9浓度与在四组患者之中并无统计学差异(P>0.05)。(3)对7例初治患者化疗前后骨髓上清液中MMP-2、TIMP-2、MMP-9浓度分别进行比较,发现MMP-2及TIMP-2浓度无显著差异,而治疗后缓解患者骨髓中MMP-9浓度较初治时显著升高(P<0.05)。(4) MMP-2、TIMP-2、MMP-9的表达与外周血幼稚细胞数之间无明显统计学差异。(P>0.05)(5) MMP-2、TIMP-2、MMP-9的表达与性别、年龄、骨髓幼稚细胞比例及外周血白细胞数之间无明显统计学差异。(P>0.05)。(6) MMP-2/TIMP-2比值在ANLL、ALL患者当中无论有无髓外浸润均无统计学差异,但均显著高于正常对照组患者(P<0.05)。(7)27例接受化疗的初治患者中,化疗有效率达59.3%。根据化疗效果分为有效组及无效组,但治疗有效及无效组之间MMP-2、TIMP-2及MMP-9浓度无显著性差异(P>0.05)。(8)实时定量PCR检测MMP-2及TIMP-2在47例初治、复发患者骨髓中的表达,各组患者骨髓单个核细胞中MMP-2及TIMP-2基因与β-Actin标化后的ACt值进行比较,具有髓外浸润的急性淋巴细胞白血病患者中MMP-2及TIMP-2表达均显著大于其它无髓外浸润的AL患者,并有统计学意义(P<0.05)。结论:MMP-2、TIMP-2、MMP-9的表达可作为判断AL恶性行为的重要生物学指标,并为靶向治疗提供方向。
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