牛磺酸对虎纹蛙(Hoplobatrachus rugulosa)非特异性免疫、消化酶活力及抗氧化能力的影响

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近年来,随着生态环境的恶化和生存空间的减少,两栖类各物种种群面临巨大的生存压力,很多种已经濒临灭绝,两栖动物种群数量的急剧下降已经引起人们的广泛关注,导致这一现象发生的原因是复杂多变的,除了栖息地破坏、过度捕捉、环境污染、紫外辐射增多,气候变化等因素外,疾病传播可能是导致其数量减少的直接原因。两栖动物因其特有的生物学和生态学特征及对环境变化的敏感性而作为生态环境监测的重要指示类群。牛磺酸是一种广泛存在于人和动物体内的条件必须氨基酸,具有调节细胞内渗透压、维持动物体脂肪正常代谢、增强机体的抗氧化能力、促进或改善动物机体免疫等功能。免疫系统在抵御病原体入侵保和保护机体免受疾病侵袭方面起着重要作用,它能够维持机体内环境的稳定,对有机体的生存有着举足轻重的意义,许多疾病的发生、发展与机体的免疫功能低下或免疫缺陷有着密切的关系,为此从调节免疫功能入手,以治疗疾病受到广泛重视。目前有关两栖类的免疫学资料相对较少,各种胁迫因子对蛀类的免疫功能的影响及其相关机制方面的研究更少,牛磺酸对蛙的免疫功能的影响国内外尚未见报道。牛磺酸(Taurine)是机体内含硫氨基酸的代谢产物,化学名称为2-氨基乙磺酸或β-氨基乙磺酸,对动物机体具有生理、药理及营养功能,是机体内不可缺少的生理活性物质。在动物体的淋巴细胞和粒细胞中,牛磺酸是含量最丰富的游离氨基酸之一,与动物的免疫功能有密切的关系。虎纹蛙分布于我国南方各省,是一种大型的经济食用蛙。为保护野生动物资源,同时满足人们的生活需求,国内外已开展虎纹蛀的人工养殖,但由于人工养殖过程中蛙易患病,导致其大量死亡,因此虎纹蛀的人工养殖仍处于初期探索阶段。本文选取野生数量正急剧下降的虎纹蛙为研究对象,建立非特异性免疫指标测定方法并对虎纹蛙进行人工灌胃牛磺酸,研究牛磺酸对虎纹蛙非特异性免疫、抗氧化能力、体内消化酶活力的影响等。主要实验结果如下:1.建立了非特异性免疫指标测定方法,并用指标评价连续5天灌胃不同浓度牛磺酸溶液(0mg/ml,0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml、1.4mg/ml、1.8mg/ml,1ml/50g)的养殖虎纹蛙的免疫指标、氧化压力指标及肝和肠内消化酶活力。结果显示:灌胃0.8mg/ml浓度牛磺酸溶液的虎纹蛙脾巨噬细胞呼吸爆发能力和全血细胞吞噬能力显著增强(P<0.05);虎纹蛙血清中丙二醛(MDA)含量随牛磺酸浓度的增加呈下降趋势,当灌胃浓度达到0.8mg/ml以上时显著低于对照组(p<0.05);血清中谷胱甘肽含量同样随牛磺酸浓度的增加呈现出先升高后降低的趋势。当牛磺酸浓度为1mg/ml时谷胱甘肽含量达到峰值,且显著高于对照组(p<0.05)。2.为研究牛磺酸在蛙体内的代谢过程,按1ml/50g灌喂蛙,灌喂后分别在第不同时间(0h,1h,2h,3h,4h,5h,6h,7h,8h,10h,12h)断头取血、肝和肠,测定血糖、肝糖含量及肝和肠内消化酶活力。结果显示:灌胃不同浓度的牛磺酸溶液后,虎纹蛙肝和肠内蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力均呈现出先上升后下降的趋势,灌胃浓度为0.4mg/ml-1mg/ml时酶活力显著高于其它浓度,而牛磺酸溶液浓度继续升高会对抑制酶活力。牛磺酸在蛙体内的作用时间主要集中灌胃后1-10h内,如肝和肠内蛋白酶活力在第3h和第7h达到峰值(P<0.05);肝中脂肪酶活力在第3h出现最大峰值(P<0.05),肠中脂肪酶活力在第7h出现最高峰值(P<0.05)。牛磺酸对肝糖原和血糖的作用效果显著,灌胃1h肝糖原含量迅速升高至峰值(P<0.05),而血糖含量在第3h降到最低(P<0.05)。通过以上研究,可以初步探索牛磺酸对虎纹蛙生理指标的影响,对于虎纹蛙的人工养殖业有重要意义。同时亦可丰富和完善蛙类免疫学研究资料,尤其对我国重要的具有科研、经济价值的蛙类的研究及人工养殖提供参考和技术指导。
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