上皮性卵巢癌组织中miR-22、PTEN的表达及作用机制研究

来源 :华北理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:czronick
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目的检测上皮性卵巢癌患者卵巢组织中miR-22、PTEN蛋白的表达水平,并分析其表达水平与临床病理特征间的关系。探讨miR-22的表达对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法1收集2017年11月-2018年8月于华北理工大学附属唐山市工人医院妇产科手术切除的40例上皮性卵巢癌组织标本作为研究对象,另收集同期正常卵巢组织30例和良性卵巢肿瘤32例作为对照,应用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测不同卵巢组织中miR-22的表达情况;利用western blot方法检测不同卵巢组织中PTEN蛋白的表达水平。分析miR-22和PTEN的表达情况与患者临床病理特征(年龄、FIGO分期、病理分级、组织学类型、淋巴结转移、腹水)之间的关系,采用Pearson相关分析分析miR-22和PTEN表达之间相关性。2体外对人卵巢癌SKOV3细胞进行培养,并利用细胞转染技术使SKOV3细胞过表达miR-22。3转染成功后,利用CCK-8实验对各组细胞的增殖能力进行检测;利用划痕实验对细胞的迁移能力进行检测;利用qRT-PCR对细胞中PTEN mRNA的表达情况进行检测,采用western blot方法检测细胞中PTEN蛋白的表达水平。结果1上皮性卵巢癌组织中miR-22表达水平(0.587±0.035)较正常卵巢组织(0.993±0.053)和良性肿瘤组织(0.975±0.058)降低,差异有统计学意义(F=815.491,P<0.05),而正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤相比较,其miR-22的表达水平无显著差异(P>0.05)。PTEN蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达(0.266±0.029)也低于正常卵巢组织(0.730±0.027)和良性肿瘤组织(0.719±0.021),差异有统计学意义(F=3676.201,P<0.05),而正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤中的PTEN表达水平相比,差异不具有统计学意义(P>0.05)。2在上皮性卵巢癌组织中,miR-22的表达水平随着FIGO分期和病理分级的进展逐渐降低(P<0.05),PTEN蛋白的表达量也随着FIGO分期升高、淋巴结转移以及病理分级进展而逐渐降低(P<0.05)。随着miR-22表达的降低,PTEN蛋白表达也呈下降趋势,miR-22表达与PTEN蛋白表达呈正相关(r=0.867,P<0.05)。3CCK-8增殖实验结果显示,与空白对照组(0.720±0.009)和miR-NC组(0.715±0.009)比较,miR-22 mimics组(0.516±0.005)细胞增殖能力显著低于其余2组(F=619.687,P<0.05),而空白对照组和miR-NC组的细胞增殖能力相比较,差异不具有统计学意义(P>0.05),miR-22可以抑制SKOV3细胞的增殖。4划痕实验结果显示,与0h相比,48h的空白对照组、miR-NC组和miR-22 mimics组的划痕愈合率分别为48.92%±0.04%、45.78%±2.49%和11.83%±0.66%,差异有统计学意义(F=176.147,P<0.05);而空白对照组和miR-NC组的划痕愈合率之间无显著差异(P>0.05),miR-22可以抑制SKOV3细胞的迁移。5 miR-22 mimics组中PTEN mRNA表达水平(6.165±0.073)显著高于空白对照组(1.005±0.007)以及miR-NC组(1.067±0.029)(F=12870.441,P<0.05),而空白对照组和miRNC组相比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。6 miR-22 mimics组细胞PTEN蛋白表达水平(0.599±0.069)相较于空白对照组(0.198±0.014)和miR-NC组(0.208±0.006)显著升高(F=93.276,P<0.05);而空白对照组和miR-NC组SKOV3细胞中PTEN蛋白表达水平无明显差异(P>0.05)。结论1 miR-22和PTEN在上皮性卵巢癌组织中的表达下调。2随着病情的进展加重,miR-22和PTEN的表达水平逐渐降低,miR-22与PTEN的表达呈正相关。3在人卵巢癌SKOV3细胞中,miR-22可上调PTEN的表达,抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移,进而参与卵巢癌的发生与发展。图13幅;表11个;参56篇。
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