CSFV抗体间接ELISA方法的建立及初步应用

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本研究通过将E2蛋白作为抗原进行包被,摸索ELISA方法建立所需的各项条件。结果表明:最佳包被浓度为40ng/孔;以1/100稀释被检血清孵育30mmin;选择1/600稀释的酶标二抗作用30min;底物作用15min后OD450读数。以此条件建立的CSFV抗体间接ELISA检测方法的敏感性为80.5%,特异性为82.5%,与IDEXX试剂盒符合率为80.6%。8头试验猪的猪瘟免疫跟踪血清中的猪瘟病毒抗体的检测结果表明:仔猪在按照1头份/头进行疫苗免疫后,整体的猪瘟病毒抗体水平在疫苗免疫后60天达到峰值,且抗体水平可以维持在较高水平105天或以上。Ⅰ和Ⅱ猪场猪瘟免疫跟踪血清中猪瘟抗体的检测结果表明,建立的CSFV抗体间接ELISA检测方法与IDEXX公司猪瘟病毒抗体检测试剂盒的一致性较好。Ⅱ猪场80头母猪整体的抗体水平高且整齐度好,至免疫后第50天,猪群整体的抗体水平仍有所提升。且在高抗体水平血清样本的区分上,建立的CSFV抗体间接ELISA检测方法较IDEXX公司猪瘟试剂盒明显。Ⅱ猪场猪群免疫当天,有14头猪的抗体是水平呈阴性,说明疫苗免疫第一次免疫的时间不合理,且在一免后33天仍未全部转阳,这将导致猪群整体的空窗期要长。建立的CSFV抗体间接ELISA方法和IDEXX公司猪瘟病毒抗体检测试剂盒相比,能够更早的检测到抗体,有利于猪群免疫猪瘟疫苗后的抗体水平检测。
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