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目的: 在阿尔茨海默病模型基础上,观察经落花生枝叶干预后AD小鼠在行为学、海马形态学以及分子水平上相关蛋白的表达变化,从而探讨该中药对AD的干预作用和机制。 方法: (1)将小鼠分为正常组、对照组和落花生枝叶组,均在干预3M和6M后进行Morris水迷宫测试,观察落花生枝叶对AD小鼠行为学的影响。(2)运用HE染色、TUNEL染色、IHC染色、ROS和ELISA方法检测小鼠海马形态学变化,并进一步观察落花生枝叶对海马组织各指标含量的影响。(3) MAPK相关通路基因和蛋白检测,运用Real time PCR和Western blotting技术检测各组小鼠P38和JNK基因和蛋白的变化,进一步观察落花生枝叶对该通路的影响。 结果: (1)在Morris水迷宫结果得出:落花生枝叶组小鼠逃避潜伏期相对对照组缩短,在撤除平台后穿越平台的次数相对对照组增加,但两者均未达到显著性差异(P>0.05)。(2)TUNEL法检测结果均显示:与对照组对比,落花生枝叶组小鼠海马神经细胞凋亡明显减少,凋亡率约为对照组的0.58倍;但仍高于正常组,约为其5倍。IHC染色法检测结果显示:对照组BAX阳性率显著高于正常组和落花生枝叶组(P<0.01),但BCL-2阳性率趋势恰好相反。ROS和ELISA方法检测得出,落花生枝叶组ROS含量、IL-6和TNF-a含量极显著低于对照组(P<0.01),但仍高于正常组,分别约为正常组的1.4、1.5、1.4倍。(3)Real time PCR和Westernblotting法检测结果显示:正常组海马组织中P38和JNK基因和蛋白表达量显著低于对照组和落花生枝叶组(P<0.01),对照组P-P38和P-JNK蛋白表达量显著高于落花生枝叶组(P<0.01)。 结论: 本研究初步证实落花生枝叶对AD转基因模型小鼠的海马神经元具有一定的保护作用。同时本研究还初步探讨了落花生枝叶神经保护作用可能与抗凋亡和抗氧化应激有关,为进一步研究提供实验室依据。