苦参碱对类风湿关节炎外周血淋巴细胞生长、细胞周期及IFN-γ、IL-4水平影响的研究

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目的在体外实验中,通过比较中药苦参碱(Mat Matrine)与甲氨蝶呤(MTX Methotrexate)对类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞(PBL)生长、细胞周期及IFN-γ与IL-4分泌水平的影响,探讨Mat对类风湿关节炎PBL的作用机制。方法1.分离纯化外周血淋巴细胞,进行体外培养,选取MTX和Mat两种药物,各设6个浓度,其中O浓度为对照组。2.应用MTT比色法测定24小时和48小时的MTX处理组、Mat处理组的吸光度值(A),计算细胞抑制率。3.应用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)检测48小时MTX处理组、Mat处理组的细胞周期;4.应用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测MTX处理组、Mat处理组的IFN-γ与IL-4的分泌水平。结果1.MTX、Mat均可抑制体外培养的PBL生长,随着药物浓度的增大,吸光度值(A)下降,细胞抑制率(IR%)增加,呈剂量依赖性。48h作用点细胞抑制率(IR%)明显大于24h作用点(P<0.001)。两药物比较无明显差别(P>0.05)。2.MTX、Mat均可使细胞周期构成发生明显变化,与对照组相比存在显著差异(P<0.001),G0/G1期细胞比例增高,S期和G2/M期细胞比例降低。随着药物浓度增加,细胞增殖指数逐渐降低,呈剂量依赖性。两药物比较无明显差别(P>0.05)。3.MTX、Mat均可降低促炎因子IFN-γ分泌水平,与对照组相比存在显著差别(P<0.001),但Mat组IFN-γ分泌水平降低幅度小于MTX组(P<0.001)。MTX、Mat组IL-4分泌水平与对照组无明显差别(P>0.05)。结论1.Mat抑制体外培养的RA患者PBL生长的作用与MTX相当。2.Mat对PBL细胞周期的阻滞作用与MTX相当。3.与MTX相比,Mat可下调IFN-γ分泌水平,Mat作用弱于MTX。MTX、Mat对IL-4分泌水平无明显影响。4.Mat、MTX作用机制有相似性,推测Mat可能具有治疗RA的潜在价值。
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