【摘 要】
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该文试从胆管癌基因治疗方面进行新的探索.在目前所进行的肿瘤基因治疗的研究中,酶/前体药物疗法（VirusDirectedEnzymeProdrugTherapy,VDEPE）,即通常所说的自杀基因疗法占有重
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该文试从胆管癌基因治疗方面进行新的探索.在目前所进行的肿瘤基因治疗的研究中,酶/前体药物疗法（VirusDirectedEnzymeProdrugTherapy,VDEPE）,即通常所说的自杀基因疗法占有重要地位.该实验采用的是AdEasyTM系统,Adtrack-CMV是穿梭载体,含有供插入外源基因的多克隆位点、与同源重组有关的腺病毒序列、GFP基因、ITR和包装信号等;Adeasy-1是骨架载体,包含腺病毒除E1和E3外的大部分DNA,E1区缺失使病毒复制缺陷.先构建含CD/TK基因的穿梭戴体,再与骨架载体一起细菌内同源重组,重组腺病毒载体转染293细胞,由于带有GFP,通过工业区光显微镜直接观察荧光,便于噬斑筛选,包装制备较纯的腺病毒.第一部分：转移质粒pAdtrack-CMV-CD/TK的构建.第二部分：重组腺病毒质粒载体pAd-CD/TK质粒的构建及鉴定.第三部分：重组腺病毒pAd-CD/TK的包装、扩增和纯化.
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