糖蛋白是由寡糖链与蛋白质共价相连而成的分子,而糖链是糖蛋白的重要组成部分,对生命体起着重要的作用。本研究以生姜糖蛋白为研究对象,利用凝集素磁性微粒技术富集生姜糖蛋白,并在糖苷酶F和糖苷酶A酶解下释放糖链,结合生物质谱技术深入分析了生姜糖蛋白的糖链结构和糖基化位点,并结合KEGG通路分析生姜糖蛋白参与的生理活动,以期为生姜糖蛋白的生理功能的研究提供参考。所取得的主要研究结果如下:1.利用凝集素芯片技术和磁性微粒筛选并富集生姜糖蛋白。结果表明,Con A、LCA、LEL、VVA、STL可以与生姜糖蛋白特异性结合,推测生姜糖蛋白中含有Man,GlcNAc,Fuc以及末端葡萄糖结构。2.MALDI-TOF-MS分析生姜糖蛋白总糖链以及Con A、STL分别富集后的生姜糖链结构。结果表明,3种样品糖链结构中复杂型糖链结构居多,且3种样品中Man,N-GlcNAc,Fuc,Xyl是常见糖型,其中Fuc修饰糖链数量最多。3.LC-MS/MS分析生姜糖肽的糖基化位点,结合KEGG通路搜索糖肽中蛋白部分所参与的生理功能。结果表明,生姜糖蛋白具有10个N-糖基化位点,其中6个位点的肽段序列通过数据库搜索发现原始蛋白,结合KEGG通路,发现可以调控植物昼夜节律途径的CK2α蛋白激酶,对糖蛋白在高尔基体中修饰加工有重要作用的COG复合体,以及影响DNA复制,转录等生命活动的Topo2。本研究为糖蛋白糖基化位点的分析以及深入理解糖蛋白结构与功能的关系提供依据。