维康醇和维泰醇诱导小鼠黑色素瘤分化的研究

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本文主要研究抗肿瘤新药维康醇和维泰醇对小鼠黑色素瘤细胞B16F0的生长抑制效应及分化诱导作用。  通过将维康醇和维泰醇按照浓度梯度配制后,将药物作用于B16F0细胞株48h和24h,用MTT法检测维康醇和维泰醇对肿瘤细胞的增殖率的影响;用Giemsa染色法观察维康醇和维泰醇对B16F0细胞形态的影响;用台盼蓝拒染法研究维康醇和维泰醇对B16F0细胞的致死率的影响;用分光光度法测定维康醇和维泰醇对黑色素生成量的影响,多巴氧化法测定对酪氨酸酶活性影响RT-PCR法测定维康醇和维泰醇对酪氨酸酶及其相关蛋白Trp1和Trp2 mRNA表达水平的影响;软琼脂克隆形成实验研究维康醇和维泰醇对细胞克隆形成能力的影响;同种动物体内抑瘤模型研究维康醇诱导分化后B16F0细胞致瘤能力。  结果显示,经维康醇和维泰醇作用48h和24h后,两种药物对B16F0细胞的生长均有明显的抑制作用,且随着药物浓度的增大,均呈现时间和剂量依赖性;经维康醇和维泰醇作用后,B16F0细胞的形态与对照组相比呈现明显的变化,出现很多树突状的分支,随药物浓度增大分支越来越明显;维康醇和维泰醇作用B16F0细胞后,胞内和胞外黑色素含量均明显增加,酪氨酸酶的活性也明显升高。维康醇和维泰醇上调Tyrosinase,Trp-1,Trp-2的mRNA表达水平;.维康醇和维泰醇使B16F0细胞的克隆形成率明显下降,随着药物浓度的增大,克隆数目明显减少;经维康醇诱导分化后的B16F0细胞,在小鼠体内的致瘤性明显降低。  本实验得出结论:1.维康醇和维泰醇对小鼠黑色素瘤B16F0细胞增殖有明显的抑制作用;2.维康醇和维泰醇能诱导B16F0细胞分化。
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