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本实验以初始体重为12g左右的红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)幼鱼为研究对象,在室内流水养殖系统中进行摄食生长实验,通过在饲料中添加不同含量的脂肪以及不同梯度的n-6多不饱和脂肪酸和虾青素以探讨饲料中脂肪含量、脂肪酸和虾青素对红鳍东方鲀幼鱼生长性能和脂肪代谢的影响,并探究其对红鳍东方鲀幼鱼肝脏和肌肉中脂肪代谢的影响。本文的研究内容和主要研究结果如下:1.饲料中添加中度水平的高脂对红鳍东方鲀幼鱼生长及肝脏功能的影响红鳍东方鲀有独特的脂肪储存机制,脂肪主要储存在肝脏中。为研究饲料中添加适度高脂对红鳍东方鲀肝脏生理的影响,进行为期74天的养殖实验,实验结束后进行肝脏转录组测定分析。本实验配制两组不同脂肪含量的实验饲料,即:对照组(脂肪含量10.44%,C)和适度高脂组(脂肪含量14.64%,HL),分别用每组实验饲料随机投喂3桶实验鱼,养殖实验在室内流水系统中进行。实验结果表明:两个处理组在生长和饲料效率上无显著性差异。但是HL组的成活率显著低于C组。通过对肝脏脂肪含量的测定发现,HL组的肝脏脂肪含量显著高于C组。血清生化指标证实了高脂摄入引起肝脏应激的存在。在肝脏转录组实验结果中发现,两组间共存在63个表达差异基因。主要集中在肽链内切酶活性、分泌和有机酸的转运等GO分类中,以及,诸如内质网蛋白质加工和DNA复制等KEGG通路中。在HL组中蛋白质在肝脏中的合成和分泌受到抑制,这一点可以通过蛋白质在肠道内的活性或浓度来证明。HL组中与肝脏保护和修复相关基因的转录受到刺激。综上所述,与最适脂肪需求相比,红鳍东方鲀幼鱼饲料中适度的高脂对生长性能没有影响,但倾向于抑制肝脏蛋白质分泌功能并刺激与肝脏保护和修复有关的基因表达。本研究结果对红鳍东方鲀幼鱼养殖的饲料管理和以肝脏作为储脂器官的鱼类脂肪代谢特性研究有一定的参考价值。2.饲料中n-6多不饱和脂肪酸(n-6 PUFA)替代饱和脂肪酸(SFA)对红鳍东方鲀幼鱼生长及脂肪酸利用的影响在以往对海水鱼的脂肪酸营养研究中,主要集中在n-3多不饱和脂肪酸(n-3PUFA),对n-6 PUFA研究相对较少,本实验通过为期74天的养殖实验,探究饲料中n-6 PUFA在红鳍东方鲀幼鱼上的利用效果。设计了六组n-6 PUFA梯度替代SFA的实验饲料,即:六组饲料中n-6 PUFA和SFA含量分别为6.01和61.65(D1)、7.31和59.00(D2)、9.19和58.24(D3)、12.35和46.46(D4)、18.77和41.45(D5)、37.98和20.04(D6)g/kg。每组饲料随机投喂3桶实验鱼,每个养殖桶中30尾鱼,养殖实验在室内流水系统中进行。实验结果表明:饲料中n-6 PUFA水平的升高导致红鳍东方鲀幼鱼增重率、饲料效率和全鱼粗蛋白质含量下降,但是增加了全鱼和肝脏的脂肪含量。通过对生长性能上差异最显著的两组实验鱼(分别为n-6 PUFA水平最低和最高的D1和D6组)肝脏进行转录组学分析得到了关于n-6 PUFA营养功能更深入的结果。与D1相比,D6组转录基因分别上调1948个和下调1961个。对差异基因分析表明,高水平的n-6 PUFA(即低水平的SFA)倾向于诱发糖酵解和三酰甘油的生物合成,但是减少了氨基酸和蛋白质的合成,并对肝脏健康造成损害。随着n-6PUFA水平的升高,肝脏中指示能量供应状况的线粒体DNA的拷贝数、线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性和糖原含量都显著降低。综上所述,n-6 PUFA在红鳍东方鲀幼鱼中的利用率低于SFA,n-6 PUFA/SFA比值过高会导致肝脏能量供应减少和脂肪异常沉积,这可能会进一步对蛋白质合成、肝脏健康和红鳍东方鲀幼鱼的生长产生负面影响。3.饲料中添加虾青素对红鳍东方鲀幼鱼生长及肝脏和肌肉脂肪沉积的影响虾青素对脂肪的调节作用在陆生动物中已经得到了广泛的报道。在饲料中添加虾青素也已被用作养殖鱼类的外源色素和抗氧化剂,但在鱼类方面几乎还没有与虾青素添加后调节脂肪代谢相关的研究信息。本实验通过为期74天的养殖实验,以研究饲料中添加虾青素对红鳍东方鲀幼鱼生长和脂肪沉积的影响。本实验制作了4组不同虾青素含量的实验饲料,即:饲料中添加虾青素含量分别为0(对照)、50(ASTX50)、100(ASTX100)和500(ASTX500)mg/kg,将每组饲料随机投喂3桶实验鱼,每桶30尾鱼,养殖实验在室内流水系统中进行。实验结果显示:与对照组相比,ASTX50组肝脏脂肪含量显著升高,而ASTX100组和ASTX500组肝脏脂肪含量较低。ASTX500组肌肉脂肪含量显著高于对照组。ASTX50组生长效果最好,而ASTX500组似乎对红鳍东方鲀幼鱼生长有不良影响。在肝脏中,与对照组相比,ASTX50和ASTX100组中与甘油三酯合成和脂肪酸合成、转运和摄入有关的基因表达显著降低,而与β氧化和单酸甘油酯水解有关的基因表达较高。在肌肉中,与对照组相比,ASTX100组与β氧化相关基因表达较高。ASTX50组投喂的实验鱼SFA和MUFA含量较高,而n-3 PUFA含量较低。实验结果表明,红鳍东方鲀幼鱼饲料中虾青素的添加对肝脏和肌肉脂肪积累有不同的调节作用,两者均呈剂量依赖性。饲料中添加过量的虾青素(500 mg/kg)对红鳍东方鲀幼鱼有不良影响。