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T-2毒素属单端孢霉烯族化合物,是该类毒素中毒性较强的一种,主要由镰刀菌产生。T-2毒素广泛存在于谷物食品中,人类和动物暴露T-2毒素会引发各种疾病,畜禽暴露T-2毒素还可能致动物源食品残留,间接危害人类健康。掌握该化合物的致毒机制对制定抗毒措施非常重要。本论文以不同剂量(0、0.02、0.05、0.1μg/mL)T-2毒素暴露的猪原代肝细胞为实验材料,运用基因芯片杂交和荧光差异双向电泳(2-DDIGE)结合MALDI-TOFMS/MS生物质谱分析技术,分别从基因和蛋白水平研究了T-2毒素对猪原代肝细胞的毒性效应及其机制,得到如下主要结果:1.基因芯片结果显示0.05μg/mLT-2毒素暴露猪原代肝细胞后共有1193个基因产生显著变化,包括562个表达上调基因和631个表达下调基因。这些变化的基因涉及氧化还原、免疫反应、转运、蛋白酶解、细胞粘附、脂类代谢、凋亡等多个生物学过程。用Real-time荧光定量PCR验证了参与肝脏外源物质代谢的P450家族基因(CYP3A39、CYP3A46和CYP2C42)以及环氧化物酶EPHX1和羧酸酯酶CES1C4基因,结果上述基因mRNA表达均呈现不同程度的升高,与芯片变化趋势相同,提示这些酶可能参与了T-2毒素的体内转化和代谢过程。2.运用荧光差异双向电泳(2-DDIGE)技术研究0.05μg/mLT-2毒素暴露后猪原代肝细胞蛋白表达谱变化,发现了260个差异蛋白。选择剂量-效应明确,且界限清晰的蛋白点,采用MALDI-TOFMS/MS生物质谱技术进行鉴定,成功鉴定出84差异蛋白,包括34个表达上调蛋白和50个表达下调蛋白。用GeneOntology、KEGG数据库以及PathwayStudioTM(v7.0)软件分析发现它们主要参与蛋白结合、电子传递、信号传导、应激反应、脂类代谢等生物学功能和信号通路。这些蛋白的改变可能与T-2毒素所致肝细胞损伤以及疾病形成过程有关。