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前言 外阴是一个独特的解剖部位，在此人乳头瘤病毒(HPV)感染经常发生，如外阴尖锐湿疣(VCA)。近年来，HPV DNA已在59～90％外阴上皮内瘤变(VIN)和10～60％外阴鳞状细胞癌(VSCC)中检测出来。HPV在这些上皮病变中的致癌作用正在研究，现已报道HPV的某些产物可以结合并抑制肿瘤抑制基因p53编码的蛋白，导致上皮细胞转化。因此，我们研究一些癌基因的表达与HPV感染的关系是非常有意义的。 外阴癌变是一个多步骤的过程，组织学上从正常，增生，不典型增生，原位癌到浸润癌的时间变迁过程支持这一点。在这种组织学变迁的过程中，涉及众多分子和基因的改变，也包括生长因子／受体基因和癌基因表达的变化。因此，我们选择粘蛋白1(MUC1)，midkine(MK)，P53 and bcl-2癌基因蛋白和EGF家族系统成员来研究它们在外阴癌变过程中的表达情况，以及与HPV感染的关系。 粘蛋白1(MUC1)是一种高分子量的跨膜糖蛋白。高水平MUC1表达提示恶性肿瘤的不良预后，目前，MUC1已在如下的肿瘤中被检测出来，如乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、胃癌和结肠癌，食管癌、咽癌、喉癌、眼睑癌和口腔粘膜癌。 Midkine(MK)是一种新的肝素结合生长／分化因子。高水平的MK表达在人的一些恶性肿瘤中被观察到了。如乳腺癌，肺癌，食管癌，胃癌，结肠癌，肝癌，卵巢癌，膀胱癌和前列腺癌，神经胶质细胞瘤，神经母细胞瘤和Wilms’瘤，在神经母细胞瘤，神经胶质细胞瘤和膀胱癌中，高水平的MK表达与临床预后不良有关。 P53蛋白是一种肿瘤抑制基因的产物，bcl-2蛋白是一种凋亡抑制基因的产物。它们在许多肿瘤的发生，发展中起重要作用。 表皮生长因子家族成员转化生长因子(TGF一a)和表皮生长因子(EGF)及表皮生长因子受体(EGFR)在许多肿瘤的发生，发展中起重要作用，如:皮肤癌、宫颈癌、食管癌、喉癌、头颈癌等。EGFR表达与外阴和宫颈癌的不良预后有关。 然而，迄今关于上述基因和生长因子在正常，良性，恶性外阴组织中的表达情况知之甚少。仍不知道它们在癌变的早期还是晚期起作用。 本研究拟通过检测这些癌基因在良性VCA，癌前病变viN和VSCC这一组外阴病变中的表达情况来阐明它们在外阴癌变中的作用，并评价是否这些蛋白高水平的表达与外阴鳞状细胞恶性转化有关，以及分析这些癌基因表达与HPV感染及外阴癌变的关系。方法 选取30例VSCC，15例VIN，10例VCA进行研究。 1.采用PCR技术检测是否有HPv存在于病变的皮肤中。 2.用链霉素卵白素一生物素一免疫过氧化物酶方法检测癌基因蛋白的表达。 3.癌基因蛋白的表达与外阴肿瘤的临床病理特征相比较。结果和结论 1.HPV DNA检测 结果:86.7%(13/15)VSCC病人是HPV阴性，13.3%(2/15)VSCC病人HPV6，11阳性，20%(l/5)VIN 111病人H卫V16，18阳性，而60%(6/10)VINI一11病人和100%(10/10)VCA病人HPV6，11或HPV16，18阳性。结论:viN和VCA与HPV感染有关，VSCC被分为HPV阳性和HPv阴性两组。 2.MUCI的表达 结果:MUCI表达水平在VSCC中是高的，在viNlll中是低的，在VINI一n、VCA和正常外阴表皮中未能检出。HPV阴性的VSCC病人与HPV阳性病人相比显示较高的MUCI表达。MUCI表达水平从高分化经过中分化到低分化的VSCC逐渐升高，在中/低分化的VsCC与高分化VSCC之间有一个统计学意义上的差异(P<0.05)。结论:MUCI表达可作为VSCC一个有效的肿瘤标志物，MUcl基因表达是VSCC生长过程中的一个晚期事件。另外，MUCI表达可能与HPy感染呈负相关。由于MUCI表达的出现与细胞去分化有联系，MUcl则与VSCC的恶性转变及进展有关。 3.MK的表达 结果:MK表达在87%(26/30)的VSCC， 60%(3/5)的VINlll和100%(10/10)的VCA中，无表达在VINI一11和正常表皮。从VINI一n经过VINlll到VSCC，MK表达具有统计学意义上的差异(P<0 .05)。MK更强表达于分化型(高分化和中分化)的VSCC中，与未分化型(低分化)的VSCC相比具有统计学意义上的差异(P<0.05)。在VSCC中，MK表达与临床分期、淋巴结转移和HPv感染无统计学意义上的相关性。高水平的MK表达在100%HPV阳性(包括VSCC，VINlll和VCA)的外阴病变中。结论:MK没有参与正常外阴上皮细胞的生长和分化过程。MK基因的表达可能是外阴鳞状细胞恶性转化的晚期事件。MK表达与外阴肿瘤细胞分化有关。HPV感染可能与MK基因表达有关。 4.TGF一。，EGF和EGFR的表达 结果:正常外阴表皮:TGF一a免疫反应细胞分散在鳞状表皮的全层;无EGF免疫反应细胞被检出;EGFR免疫染色缺失或仅存在于一些基底细胞中。在VINI一11:TGF一a表达与正常表皮相同;EGF弱染于2/10(20%)的病例中;无EGFR表达。在VIN 111:TGF一a、EGF和EGFR表达分别在100%、100%和40%病例中。在VSCC:EGFR在17/25(68%)病例中的表达显著地少于TGF一a 25/25(100%)和EGF 25/25(100%)。在VCA:TGr一。和EGF表达于10/10(100%)例的鳞状表皮中，EGFR，表达于80%病例中，EGFR分布直接与EGF免疫定位点相平行。在vSCC中TGF一a、EGF和EGF表?