论文部分内容阅读
目的:本课题以双侧颈总动脉永久性结扎法制造缺血性痴呆大鼠模型,观察具有补气、活血通络功效的补阳还五汤对痴呆大鼠行为学改变、及大脑皮层和海马CA3区突触素(SYN)与胆碱乙酰转移(ChAT)酶表达的影响,探讨补阳还五汤治疗血管性痴呆的作用机制,为临床运用提供实验依据。 方法:选用80只健康SD大鼠,雌雄各半,12-14月龄,体重360±40g。实验动物分为正常对照组、假手术组、模型组和治疗组共4组。造模前、造模后60天分别对动物进行Morris水迷宫实验,来筛选合格动物。治疗组取补阳还五汤(13.3g/kg.d)灌胃30天,假手术组与模型组选用相同体积蒸馏水灌胃,正常对照组不予灌胃。治疗结束后行水迷宫实验,评价各组大鼠学习记忆能力;免疫组化染色观察各组大鼠皮层、海马CA3区与突触相关蛋白-SYN和与记忆密切相关的酶-ChAT的表达变化。SYN的阳性表达使用光密度值(OD值)检测,ChAT的表达使用阳性细胞百分比比较。 结果:(1)水迷宫行为学实验显示:模型组和治疗组大鼠逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少,与假手术组相比有显著性差异(户<0.05);治疗组大鼠平均潜伏期缩短,穿越平台次数增多,与模型组相比具有显著性差异CP<0.05);假手术组大鼠潜伏期、穿越平台次数与正常组相比无显著性差异(p>0.05),无统计学意义。(2)SYN免疫组化结果显示:模型组和治疗组大鼠皮层、海马CA3区SYN表达显著减少,与假手术组相比有显著性差异(P<0.05);治疗组大鼠镜下棕黄色点片状或颗粒状SYN反应物与模型组相比显著增多,有显著性差异(P<0.05);假手术组SYN表达与正常对照组相比无显著性差异(p>0.05),不具有统计学意义。(3)ChAT免疫组化结果显示:模型组和治疗组表达与假手术组相比明显减少,有显著性差异CP<0.05);治疗组表达与模型组相比明显增多,有显著性差异(P<0.05);假手术组表达与正常组相比无统计学差异(p>0.05)。 结论:实验结果证明双侧颈总动脉永久性结扎(2-VO)法使大鼠学习记忆能力明显减退,达到痴呆标准,证明造模成功。通过Morris水迷宫实验证实,补阳还五汤可以明显改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力,揭示补阳还五汤对血管性痴呆有治疗作用。免疫组化结果显示补阳还五汤可能通过提高大鼠大脑皮层及海马CA3区SYN、ChAT表达,促进突触重塑,改善胆碱能神经元功能,从而提高大鼠空间辨别学习记忆能力。