稻瘟菌诱导性水稻蛋白激酶基因的cDNA克隆及其功能研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:penghong97
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该研究以水稻稻瘟病为体系,以阐明稻瘟菌诱导的蛋白激酶在水稻抗稻瘟菌中所起的作用为目标,首先通过反向northern确认了非亲和性稻瘟菌侵染稻叶中分离的一个差异显示cDNA片断S2的抗病诱导性,然后以它为探针,筛选抗病稻叶的cDNA文库,获得了与探针相对应的水稻cDNA克隆Oswak2.不同因素刺激下该基因的诱导表达时间动态初步推断该基因和水稻抗稻瘟菌有关.为进一步搞清Oswak2及其它两个稻瘟菌侵染诱导的Osepkl和Oseptil基因在水稻抗稻瘟菌中的作用,构建了能形成这几个基因sense转录物、antisense转录物和mRNAduplex结构转录物的植物转化双元载体,并通过农杆菌介导转化了水稻,共获得了372株转基因植株.采用稻叶离体接种的方法对这些转基因水稻同时进行了稻瘟菌亲和性和非亲和性小种的接种.另外,为了研究水稻抗稻瘟菌的抗病分子机制,还利用酵母双杂交体系,对Oseptil和Oswak2的作用蛋白进行了研究,通过筛选抗病稻叶的酵母表达文库,初步得到了和Oswak2互作的阳性克隆7个,和Oseptil互作的阳性克隆129个.
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