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近年来我国癌症的发病率和死亡率逐年攀升,严重威胁着人类健康及生命。据统计仅2015年中国新增癌症患者人数约为429.2万,死亡人数约为281.4万。目前临床上多采用手术和放化疗法治疗癌症,但因上述疗法缺乏对肿瘤细胞的特异性,导致治疗过程中正常细胞也严重受损,因此急需探索肿瘤治疗的新方法。基因治疗是一种恶性肿瘤的生物疗法,但关键问题是如何安全高效地将治疗基因递送至人体内。目前肿瘤基因治疗中腺病毒载体应用最广泛,溶瘤腺病毒的优势是仅杀伤肿瘤细胞但不伤害正常细胞,因此可作为一种抗肿瘤基因药物加以应用。凋亡素(Apoptin)是鸡贫血病毒VP3基因编码的一种功能蛋白,仅在肿瘤细胞内复制;血凝素-神经氨酸酶(HN)是新城疫病毒的一种表面蛋白,能激活细胞凋亡途径。因此本研究构建表达Apoptin和HN的重组腺病毒Ad-VT(Ad-Apoptin-hTERTp-E1a)和Ad-HP(Ad-HN-PEG3p-E1a),研究其是否能成为有效的抗肿瘤基因药物。本研究分别用Ad-VT感染人骨肉瘤和正常细胞,以及用Ad-HN-PEG3p-E1a感染人胃癌细胞。通过MTT法检测重组腺病毒对肿瘤细胞和正常细胞的增殖抑制率。体外实验中,在荧光显微镜下观察肿瘤细胞和正常细胞经AO/EB染色、DAPI染色后的形态学变化;再利用Annexin V/PI方法通过流式细胞术和染色分析重组腺病毒对肿瘤细胞的抑制作用方式,并通过Caspase酶活性检测以上重组腺病毒对肿瘤细胞的抑制作用途径。体内实验中,采取构建动物模型并考察肿瘤生长趋势和平均生存期。Ad-VT和Ad-HN-PEG3p-E1a能抑制两种肿瘤细胞增殖,并伴随一定的时间效应和剂量效应关系,但对正常细胞无影响。体外实验中验证了以上两种重组腺病毒能诱导肿瘤细胞凋亡,且是通过激活Caspase相关酶方式实现的。体内实验中,Ad-VT和Ad-HN-PEG3p-E1a能有效减缓瘤体生长并能延长平均生存期。结果表明,Ad-VT(Ad-Apoptin-hTERTp-E1a)和Ad-HP(Ad-HN-PEG3p-E1a)对肿瘤细胞有特异性抑制作用,对于今后肿瘤治疗的临床应用具有一定的参考价值。