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中药治疗肿瘤由于具有毒副作用小、不良反应少等优点,其相比较于西药显示出了明显的优势。百合是很常见的植物,除了观赏之外还有很好的药用价值,百合早就被卫生部首批为一种药食兼用的植物,其中许多的有效活性成分已被许多学者研究在抗肿瘤、增强机体免疫力、治疗放射后的症状等多个方面有很好的疗效,比如百合其中一种成分秋水仙碱就被证实具有抗肿瘤作用。现已有部分文献报道百合的某些有效成分具有抗肿瘤的作用,但其作用机制尚不清楚。胃癌是危害人类健康的恶性肿瘤之一,由于其早期发现率较低,因此化疗在大部分胃癌患者的治疗过程中有着至关重要的作用。百合对人胃癌SGC-7901细胞的影响的相关研究没有被报道过,因此本文就百合提取物生物碱和甲醇提取物对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用及其机制进行初步探讨。目的本实验研究百合提取物生物碱和甲醇提取物对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法应用MTT比色法检测不同浓度的百合提取物生物碱和甲醇提取物作用SGC-7901细胞24h、48h、72h的抑制率;倒置相差显微镜和荧光显微镜下观察AO/EB染色的SGC-7901细胞的细胞形态及其变化;采用流式细胞术检测SGC-7901细胞的细胞周期变化及其SGC-7901细胞的凋亡率;通过免疫印迹法检测SGC-7901细胞中caspase-3蛋白的表达。结果1、MTT检测结果显示,不同浓度的百合提取物生物碱和甲醇提取物能显著地抑制SGC-7901细胞的生长增殖,百合提取物生物碱0.05 g/L作用人胃癌SGC-7901细胞24h、48h、72h后的抑制率分别为21.5%、28.27%、37.13%,0.075g/L的抑制率分别为31.87%、40.63%、49.30%,0.1g/L的抑制率分别为40.90%、50.13%、58.10%,0.125g/L的抑制率分别为51.33%、65.60%、80.07%,0.15g/L的抑制率分别为65.30%、74.06%、91.93%,甲醇提取物0.8 g/L作用人胃癌SGC-7901细胞24h、48h、72h后的抑制率分别为5.53%、14.58%、23.39%,0.9g/L的抑制率分别为19.62%、30.34%、37.23%,1.0g/L的抑制率分别为27.26%、38.73%、46.76%,1.1g/L的抑制率分别为35.85%、45.84%、53.31%,1.2g/L的抑制率分别为42.23%、52.32%、58.39%,1.3g/L的抑制率分别为50.29%、58.31%、66.47%,1.4g/L的抑制率分别为59.36%、69.32%、82.69%,1.5g/L的抑制率分别为69.39%、86.15%、96.74%,1.6g/L的抑制率分别为76.33%、96.74%、98.32%,结果显示呈现时间、剂量依赖性。2、不同浓度的百合提取物生物碱和甲醇提取物处理SGC-7901细胞48h后,SGC-7901细胞经AO/EB双染后,荧光显微镜下观察,呈现生长缓慢和凋亡现象,可以观察到正常细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞、坏死细胞。3、流式细胞术细胞周期分析显示,阻滞细胞在G2/M期,空白对照组、百合提取物生物碱0.05 g/L、0.1 g/L、0.15 g/L作用人胃癌SGC-7901细胞48h后G2/M期细胞含量分别为10.70%、15.81%、20.90%、30.02%,空白对照组、甲醇提取物0.9g/L、1.1 g/L、1.4 g/L作用人胃癌SGC-7901细胞48h后G2/M期细胞含量分别为10.70%、13.31%、19.99%、27.03%,呈现剂量依赖性。4、流式细胞术检测细胞凋亡率显示,空白对照组、百合提取物生物碱0.05 g/L、0.1 g/L、0.15 g/L作用人胃癌SGC-7901细胞48h后细胞的凋亡率分别为1.57%、6.54%、11.14%、20.35%,空白对照组、甲醇提取物0.9 g/L、1.1 g/L、1.4 g/L作用人胃癌SGC-7901细胞48h后细胞的凋亡率分别为1.57%、5.36%、11.78%、21.32%,且具有剂量依赖性。5、免疫印迹实验结果显示,SGC-7901细胞内有caspase-3蛋白的表达,随着药物浓度的逐渐增大,SGC-7901细胞内caspase-3蛋白的表达量逐渐增多。结论1、不同浓度的百合提取物生物碱和甲醇提取物能显著地抑制SGC-7901细胞的生长增殖,并呈现时间、剂量依赖性。2、可以改变细胞周期,使得SGC-7901细胞阻滞在G2/M期。3、可以诱导SGC-7901细胞的凋亡。上调SGC-7901细胞内caspase-3蛋白的表达,是诱导SGC-7901细胞凋亡的重要作用机制之一。