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糖尿病肾病(Diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病(Diabetes mellitus,DM)的主要的微血管病变之一。但如今DKD的发病机制仍然未被完全阐释明确。有相关文献报道持续的低度炎症反应,对DKD的发生与发展起非常重要的作用。其中有研究表明JAK2/STAT3信号通路也参与了DKD的演变。近年来发现雷公藤多苷(Tripterygium Wilfordii Polyglycosides,TWP)具有降低DKD患者尿蛋白水平的作用,然而其毒性限制了在临床上的广泛应用。因此,寻找雷公藤多苷的活性单体形式变得迫不及待。本研究提取雷公藤多苷其中一种活性单体“甲素”,在课题组前期动物实验的基础上,应用小鼠永生足细胞系为研究对象,以雷公藤甲素(Triptolide,TP)作为干预药物,探讨雷公藤甲素在高糖状态下对足细胞的保护作用及对JAK2/STAT3信号通路的影响及其可能机制。本研究以小鼠肾小球永生足细胞为研究对象。足细胞分组:正常对照组(NG组:无糖RPMI-1640培养基包含5.5mmol/L葡萄糖),甘露醇组(MA组:无糖RPMI-1640培养基包含5.5mmol/L葡萄糖和甘露醇24.5mmol/L),高糖组(HG组:无糖RPMI-1640培养基包含30mmol/L葡萄糖)和高糖+雷公藤甲素组(HG+TP组:无糖RPMI-1640培养基包含30mmol/L葡萄糖+雷公藤甲素3 ng/ml)。将培养后的足细胞以上述分组方式进行干预,所有实验组将培养24h或48h。然后收集干预后的足细胞进行体外实验。我们将通过实时定量PCR及免疫印迹western blot等方法检测足细胞特异性指标nephrin及podocin,以及JAK2/STAT3通路上炎症因子的表达情况。通过上述实验我们得到了如下结果:(1)qPCR法检测足细胞JAK2、STAT3、ICAM-1和IL-6的mRNA表达量:HG组足细胞ICAM-1和IL-6 mRNA表达较NG组明显升高(P<0.05),TP组足细胞ICAM-1和IL-6 mRNA表达较HG组显著降低(P<0.05),总的JAK2、STAT3的mRNA水平表达量各组间无差异(P>0.05)。(2)qPCR法检测足细胞podocin和nephrin的mRNA表达量:HG组足细胞nephrin和podocin mRNA表达较NG组明显降低(P<0.05),TP组足细胞nephrin和podocin mRNA表达较HG组显著升高(P<0.05)。(3)Western Blot法检测足细胞p-STAT3、p-JAK2、ICAM-1和IL-6的蛋白表达:HG组足细胞p-STAT3、p-JAK2、ICAM-1和IL-6的蛋白表达较NG组明显升高(P<0.05),TP组足细胞p-JAK2、p-STAT3、IL-6和ICAM-1蛋白表达较HG组显著降低(P<0.05)。(4)Western Blot法检测足细胞podocin和nephrin的蛋白表达:HG组足细胞nephrin和podocin的蛋白表达量较NG组明显降低(P<0.05),TP组足细胞nephrin和podocin蛋白表达较HG组显著升高(P<0.05)。进而可得到如下结论:(1)高糖诱导能够导致足细胞损伤,表现为足细胞特异性指标podocin及nephrin的表达显著下降。(2)通过雷公藤甲素的干预,受损的足细胞能够得到一定程度的修复,表现为podocin及nephrin的表达明显改善。(3)通过对JAK2/STAT3炎症通路的检测,高糖能够激活此通路,使JAK2、STAT3、IL-6、ICAM-1的表达升高,加入雷公藤甲素后可部分抑制JAK2/STAT3通路的表达,进而发挥足细胞的保护作用。