1,25(OH)2D3调控STAT3通路对高糖状态下肾小管上皮细胞转分化的影响

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoyanmeimei
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目的:1.探索高糖环境对人近端肾小管上皮细胞转分化的影响;2.探索1,25(OH)2D3对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞的转分化是否具有保护作用,并检测JAK/STAT信号通路蛋白STAT3的变化,研究1,25(OH)2D3发挥作用的可能机制,为临床糖尿病肾病的治疗提供新的诊疗思路。方法:使用浓度为30mmol/L的高糖培养基刺激人近端肾小管上皮细胞,12h,24h,48h后收集细胞,并于每个时间点设立正常对照组,Real Time-PCR法检测各组中α-SMA mRNA、E-cadherin mRNA、pSTAT3(磷酸化的STAT3)mRNA的相对表达量,确定高糖刺激的最佳时间点为48h;再将体外培养的人近端肾小管上皮细胞分为正常对照组(葡萄糖5.5mmol/L),高糖组(葡萄糖30mmol/L),高糖+1,25(OH)2D310-10mmol/L组,高糖+1,25(OH)2D310-9mmol/L组,高糖+1,25(OH)2D310-8mmol/L组,48小时后收集各组细胞,Western-Blot法检测各组中α-SMA、E-cadherin、pSTAT3蛋白的表达水平。结果:高糖刺激不同的时间点,各组α-SMA mRNA、pSTAT3 mRNA表达水平均较正常对照组显著升高(p<0.05),且随着刺激时间的延长呈递增趋势;E-cadherin mRNA表达水平均较正常对照组显著降低(p<0.05),且随着刺激时间的延长呈递减趋势;加入不同浓度的1,25(OH)2D3与高糖共同干预48小时后,各组α-SMA、pSTAT3的蛋白表达水平较高糖组相比均不同程度的降低,且随着1,25(OH)2D3剂量的增加呈递减趋势;E-cadherin的蛋白表达与高糖组相比均不同程度的增加,且随着1,25(OH)2D3剂量的增加呈递增趋势。结论:1.高糖环境可促进肾小管上皮细胞转分化的发生,并引起STAT3通路的磷酸化,促进肾间质纤维化的进展;2.1,25(OH)2D3能够减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞的转分化,其机制可能与抑制STAT3信号通路的磷酸化有关。
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