营养物质协同真菌修复机油污染土壤研究

来源 :重庆理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hengheng5251984
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由于工业化进程加快,生态环境遭受迫害,可利用土壤资源急剧减少。石油烃为有机污染土壤的主要污染物,过量石油烃进入土壤环境中难以去除,并通过无知觉扩散、释放直接破坏生态系统并威胁人类健康。本论文研究了场地石油烃污染土壤中菌株降解机油可行性,不同环境因素对其降解效果影响,并选用不同类型营养物质刺激菌株修复机油污染土壤,探讨了修复前后土壤中微生物多样性,主要的研究成果如下:高浓度场地石油烃污染土壤中可筛选出多株具有降解机油性能的菌株,比较去除效果筛选出最优菌株,经过ITS(Internal transcribed spacer)测序鉴定,此菌株为真菌Aspergillus versicolor,探究四个单因素变量(菌液添加量、p H、盐度、降解时间)对其降解效果的影响,在机油初始浓度为2500 mg/L,加菌量5%、p H=6.0、盐度3 g/L,持续5 d的条件下,菌株对水中机油的降解率最高能达到42.6%。仅改变环境因素相对于提高降解效果较为局限,但加入1.8 m L槐糖脂或1.5 m L茶皂素溶液进行生物强化比单独使用菌株去除率分别可提高19.4%、28.6%,降解率最高可提升至71.2%。机油污染土壤中总石油烃浓度为5225 mg/kg,通过真菌Aspergillus versicolor直接降解污染土壤中石油烃效果并不理想,添加营养物质可有效增强真菌Aspergillus versicolor降解作用及石油烃可利用性,以蔗糖、酒石酸等外加C源作为营养物质效果最佳,当真菌Aspergillus versicolor菌液含量为20%,以10%蔗糖或7%酒石酸为营养物质,15 d土壤中石油烃的降解率分别为53.23%、31.12%,30 d分别为55.63%、42.9%。修复后土壤中p H均有所降低,CO2释放量均显著提高,修复30 d后当天测量自然放置的机油污染土壤CO2释放量在22.28~31.83(m L·kg-1),蔗糖修复组CO2释放量平均达174.59(m L·kg-1),土壤呼吸强度可增强约5倍,SEM形貌显示石油烃污染土壤孔隙堵塞,无污染土壤及修复后土壤孔隙结构疏松。以蔗糖和葡萄糖复配营养物质从而刺激真菌Aspergillus versicolor,修复30 d,可显著提高真菌Aspergillus versicolor降解石油烃效率,最多可使土壤中石油烃降解率达76.1%。蔗糖刺激真菌修复时间对其降解效果影响较小,蔗糖复配葡萄糖刺激菌株降解效果与降解时间呈正相关,修复5周后降解率可高达72.5%。生物修复前后微生物多样性显著改变,W1为洁净土壤,W2为机油污染土壤,W3为真菌Aspergillus versicolor修复后土壤,W4为蔗糖刺激真菌修复后土壤,W5为蔗糖复配葡萄糖刺激真菌修复后土壤,三种生物修复处置后土壤中石油烃的去除效果W3<W4<W5,对于真菌水平上,W2与W1真菌群落丰富度相近,真菌多样性W1>W2>W3>W4>W5,说明去除效果越好真菌种类越单一,W2优势菌门为子囊菌门(Ascomycota),W3、W4和W5在群落结构中占比分别增加99.64%、99.92%、99.81%,优势菌属由分支孢子菌属(Cladosporium)转变为曲霉菌属(Aspergillus),说明投加外源真菌修复切实有效;对于细菌水平上,相比于W2,W4和W5丰富度显著提高,W3丰富度降低,细菌多样性W4>W5>W1>W2>W3,W1、W2优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteiota),W3、W4和W5放线菌门(Actinobacteiota)占比依次提高为40.92%、56.20%、61.57%,W4、W5厚壁菌门(Firmicutes)急剧减少,芽孢杆菌属(Bacillus)仍为优势菌属,但占比分别下降为8.15%、9.35%,新增另一优势菌属微杆菌属(Microbacterium),在各修复组土壤细菌群落中占比为34%左右。
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