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1文献研究通过查阅相关文献,对二至丸来源、药理作用、临床应用和代谢组学及其在中药研究中的应用进行了综述。2二至丸保肝活性成分的药效学研究采用聚酰胺柱层析分离二至丸乙酸乙酯部位,分别用30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇洗脱,得到EZW-1、EZW-2、EZW-3、EZW-4,4个保肝活性成分群。2.1培养L-02型肝细胞,采用CCl4和H2O2体外诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中天门冬氨酸转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平,测定上清液中丙二醛（MDA）的含量和过氧化物岐化酶（SOD）活力及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,MTT法检测细胞存活和增殖活性。发现EZW-1、EZW-2、EZW-3、EZW-4可明显降低由CC14所致肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及MDA含量的升高,还可显著提高由CCl4所致肝细胞存活率和SOD活力及GSH-Px活性的降低,EZW-2的效果最好。EZW-1、EZW-2、EZW-3、EZW-4可使H2O2升高的肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及MDA含量明显降低或恢复,还可显著提高CC14降低的肝细胞存活率和SOD活力及GSH-Px活性,EZW-2的效果最好。EZW-2、EZW-3对体外肝细胞损伤有较强的保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。2.2将150只昆明种小鼠随机分成15组:正常组、四氯化碳损伤模型组、EZW-1的高、中、低剂量组(19.8、13.2、6.6g·kg-1)、EZW-2 的高、中、低剂量组(19.8、13.2、6.6 g·kg-1)、EZW-3的高、中、低剂量组(19.8、13.2、6.6g·kg-1)、EZW-4的高、中、低剂量组(19.8、13.2、6.6 g·kg-1)和联苯双酯组(150 mg·kg-1)。EZW-1、EZW-2、EZW-3、EZW-4 高、中、低剂量组每日ig 1次,共7 d,末次ig后除正常组外,其余所有小鼠予ip 0.1%CCl4 20 mL·k-11次,16 h后处死全部小鼠,收集肝组织及血清标本,测定小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性;测定肝匀浆中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力;计算肝脏指数,同时对肝组织进行病理学检查。发现EZW-1、EZW-2、EZW-3、EZW-4能降低CC14致小鼠急性肝损伤血清ALT、AST值升高,降低肝匀浆中MDA的含量,增强SOD的活性,具有明显的剂量依赖性。通过病理学切片观察,EZW-1、EZW-2、EZW-3、EZW-4能显著改善肝组织的病理变化,以EZW-2效果最好。EZW-2、EZW-3对CC14造成的小鼠急性肝损伤具有显著的保护作用,为其保肝活性的效应部位。3二至丸对CCl4致大鼠急性肝损伤代谢组学研究3.1研究CCl4致大鼠急性肝损伤模型大鼠尿液内源性代谢物变化特点和二至丸对异常代谢的调节作用,寻找二至丸治疗肝损伤可能的代谢生物标志物,以探索二至丸治疗肝损伤的作用机制。采用四氯化碳复制大鼠急性肝损伤模型,将大鼠分为模型组、正常组、二至丸先给药后损伤组和二至丸先损伤后给药组,运用快速分离液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF/MS）技术,对各组大鼠尿液中内源性代谢物进行测定,采用主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）、正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）等模式识别方法对多变量数据进行分析,t检验方法进行显著性统计分析。模式识别中模型组大鼠能较好地与其他3组分开;进一步从模型组大鼠尿液代谢图谱中筛选出27个对分类有显著贡献的离子,定性鉴定出14种潜在代谢生物标志物,这些内源性物质在二至丸组大鼠体内得到了不同程度的恢复。通过独特通路分析（IPA）,找到7条肝损伤代谢通路,构建了二至丸治疗四氯化碳致急性肝损伤的尿液代谢组学特征网络图。二至丸可以使造模后大鼠的体内代谢物含量有不同程度的恢复,提示其治疗作用可能与7条肝损伤代谢通路的调节有关。3.2研究CCl4致大鼠急性肝损伤模型大鼠胆汁内源性代谢物变化特点和二至丸对异常代谢的调节作用,寻找二至丸治疗肝损伤可能的代谢生物标志物,以探索二至丸治疗肝损伤的作用机制。采用四氯化碳复制大鼠急性肝损伤模型,将大鼠分为模型组、正常组、二至丸先给药后损伤组和二至丸先损伤后给药组,运用快速分离液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF/MS）技术,对各组大鼠胆汁中内源性代谢物进行测定,采用主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）、正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）等模式识别方法对多变量数据进行分析,t检验方法进行显著性统计分析。模式识别中模型组大鼠能较好地与其他3组分开;进一步从模型组大鼠胆汁代谢图谱中筛选出26个对分类有显著贡献的离子,定性鉴定出9种潜在代谢生物标志物,这些内源性物质在二至丸组大鼠体内得到了不同程度的恢复。通过独特通路分析,找到4条肝损伤代谢通路,构建了二至丸治疗四氯化碳致急性肝损伤的胆汁代谢组学特征网络图。二至丸可以使造模后大鼠的体内代谢物含量有不同程度的恢复,提示其治疗作用可能与4条肝损伤代谢通路的调节有关。独特通路分析能有效的识别药物靶标。它能帮助指导可实验的预测,深刻理解药物作用机制,提高研究效率。