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结肠癌是世界第三大常见癌症,在临床上有着较高的转移率和复发率。目前,对于肿瘤的发病原因和治疗方法的研究,逐渐从肿瘤细胞本身向肿瘤微环境聚集,新的研究热点逐渐倾向于以肿瘤微环境为作用靶点,抑制肿瘤的发生、发展和转移。核心蛋白聚糖(Decorin, DCN)是细胞外基质的主要成分,有研究报道指出通过对正常、癌变恶化前、恶性癌变的结肠组织进行DCN的免疫组化和原位杂交实验,发现恶性结肠肿瘤缺少DCN的mRNA以及其丧失其免疫反应活性,并且DCN在肿瘤周围的表达分布会影响着肿瘤生成和血管增生肿瘤微环境是指肿瘤在其发生过程中所处的内环境,由间质细胞和细胞外基质成分组成。肿瘤的形成主要依赖于癌细胞与基质细胞相互间的诱导和交流,目前肿瘤基质已经成为癌症治疗的热门靶点。EMT是众多上皮性肿瘤细胞获得恶性表型的一个重要机制。在微环境中,肿瘤细胞通过与基质细胞问活跃的相互作用,发生EMT从而促进恶性肿瘤发生侵入性转移。已有研究发现,EMT发生期间,细胞间的粘附能力下降,细胞失去其上皮性状,获得间质性状,致使其迁移能力和侵袭能力显著增加。本课题主要对DCN在微环境中影响结肠癌细胞LOVO发生EMT的作用机制展开研究。结果如下：(1)构建DCN原核表达系统,制备纯化出大量DCN重组蛋白成功构建DCN重组质粒pFLAG-ATS-DCN,并在大肠杆菌系统中表达,分离纯化DCN,并鉴定其生物学活性。表明人源DCN能够从原核表达系统中大量制备,并且具有抑制结肠癌细胞增殖和迁移的生物学活性。(2)DCN在微环境中抑制结肠癌细胞EMT过程的形态学变化成功构建结肠癌细胞LOVO和结肠成纤维细胞CCD-18CO的间接共培养模型,结果显示EMT过程中LOVO细胞分别在外源性和内源性DCN过表达的肿瘤微环境中入侵运动能力各自降低了36.7%、49.4%,并且划痕迁移能力也各自降低了45.8%、20%。表明在肿瘤微环境中,DCN的过表达抑制结肠癌细胞的侵袭和转移,从形态学方面显示出EMT过程受到阻碍。(3)DCN在微环境中抑制结肠癌细胞EMT过程的作用机制成功构建结肠癌细胞LOVO与成纤维细胞CCD-18CO的3D共培养模型,并且分别从添加外源性DCN重组蛋白和在内源性转染DCN质粒两方面来实现DCN的过表达。结果显示基质金属蛋白酶MMP2、MMP9的表达量下降,上皮标志物E-cadherin的表达量增加,同时间质标志物(Vimentin、α-SMA)、EMT蛋白标志物(Snail、Slug)、细胞周期蛋白(CDK4)、细胞炎性因子(p-catenin)的表达量均下降。说明DCN在微环境中通过抑制结肠癌细胞的增殖侵袭和转移,来抑制其上皮间质转化的EMT过程。综上所述,本项课题研究揭示了DCN在微环境中发挥着抑制结肠癌细胞EMT的发展的作用,通过降低基质金属蛋白酶的表达、上调上皮性状标志物蛋白E-cadherin的表达、下调间质性状标志物蛋白Vimentin、α-SMA,同时在形态学方面表现出抑制结肠癌细胞发生EMT过程中的侵袭和转移。此外,通过降低EMT过程中的标志物蛋白Snail、Slug的表达,抑制结肠癌细胞的上皮性向间质性的转化。