宫颈癌细胞GM-CSF免疫学作用相关性研究

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhongbeiljb
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目的:  人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)是一种刺激造血干细胞增殖和分化的细胞因子,可诱导粒细胞及巨噬细胞前体细胞集落生长,主要由巨噬细胞和T淋巴细胞分泌,某些肿瘤细胞也可分泌产生,但不同类型肿瘤中肿瘤源性GM-CSF的免疫学作用及其调控机制仍不清楚。本实验通过研究宫颈癌细胞GM-CSF的表达对环氧合酶-2(COX-2)和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨GM-CSF在宫颈癌发生发展中的作用。  方法:  收集临床宫颈癌标本52例及正常宫颈15例和宫颈上皮内瘤变(CIN)组织标本21例作为对照进行免疫组织化学染色,分析宫颈癌组织GM-CSF的表达与COX-2和iNOS表达的相关性;为了从细胞水平进一步论证其相关性,本实验使用宫颈癌细胞系Caski细胞系,Caski细胞经GM-CSF转染后过表达GM-CSF,并通过RT-qPCR和Western blot检测COX-2和iNOSmRNA及蛋白的表达情况,以空质粒转染的Caski细胞为对照,在细胞模型中探讨GM-CSF强制表达对COX-2和iNOS表达的影响。同时,通过GM-CSFsiRNA干扰Caski细胞GM-CSF表达后,用RT-qPCR及Western blot方法检测iNOS/COX-2mRNA及蛋白表达情况。  结果:  免疫组化结果显示,宫颈癌组织GM-CSF表达明显低于正常组和CIN组(P均<0.05),而COX-2及iNOS的表达显著高于正常组(P<0.01),但与CIN组无明显差异;统计学分析发现GM-CSF与COX-2/iNOS的表达呈负相关(r=-0.542/-0.499)。细胞水平结果显示,与空质粒转染的细胞相比,转染GM-CSF的Caski细胞COX-2/iNOS在mRNA及蛋白表达水平都有显著下降(P均<0.05);GM-CSF在被干扰后,干扰组与对照组相比COX-2/iNOS在mRNA及蛋白表达水平有明显差异(P均<0.05)。  结论:  在组织和细胞表达水平GM-CSF与COX-2/iNOS的表达均呈负相关,GM-CSF可能通过下调COX-2/iNOS表达而具有抗宫颈癌作用。
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