动物组织中兽药残留的化学发光和生物素-亲和素放大免疫检测方法研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sishenshini
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动物源食品中兽药残留是影响食品安全的主要因素之一,许多国家均规定了食品动物禁用的兽药清单,并规定在动物源食品中不得检出,因此,研究高灵敏度的兽药残留检测技术,对监控动物性食品中禁用兽药残留十分重要。本试验研究建立了动物组织中氯霉素和莱克多巴胺残留的化学发光免疫检测方法,并采用生物素-亲和素放大技术,研究建立了高灵敏度的生物素-亲和素放大酶联免疫检测方法,为兽药残留监控提供了灵敏、快速的检测方法。 研究建立了鱼和虾肌肉中氯霉素(Choloramphenicol,CAP)残留的直接竞争化学发光免疫检测方法。合成了CAP和辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)的偶联物(CAP-HRP)。方法检测限为5.7×10<4>μg/kg,检测范围为3.1×10<3>μg/kg -0.45μg/kg,鱼和虾肌肉组织中的添加浓度为0.001μg/kg、0.01μg/kg、0.1μg/kg和1μg/kg时,鱼肌肉的回收率为67.8%-76.6%,批内变异系数为9.6%-12.5%,批间变异系数为13.1%-16.7%;虾肌肉的回收率为63.4%-75.6%,批内变异系数为10.1%-12.4%,批间变异系数为13.6%-17.6%。 研究建立了猪尿中莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)残留的直接竞争化学发光免疫检测方法。合成了莱克多巴胺和辣根过氧化物酶的偶联物(RAC-HRP),方法的检测限为0.09 ng/ml,空白猪尿中添加浓度为0.5 ng/ml,10 ng/ml和100 ng/ml时,检测范围为0.3 ng/ml-157.0 ng/ml;回收率为76.3%-87.6%,批内变异系数为10.0%-12.2%,批间变异系数为14.2%-15.2%。 研究建立了猪尿中莱克多巴胺残留的间接竞争化学发光免疫检测方法。方法检测限为0.003ng/ml,猪尿中添加浓度为0.1 ng/ml、1 ng/ml和10 ng/ml时,检测范围为0.01 ng/ml-65.8 ng/ml,回收率为72.2%-87.0%,批内变异系数为10.1%-13.3%,批间变异系数为12.2%-16.0%。 研究建立了猪肌肉中CAP和RAC残留的生物素-亲和素放大酶联免疫检测方法。空白猪肌肉中RAC添加浓度为1 μg/kg、5 μg/kg和25 μg/kg时,RAC的检测范围为0.30 μg/kg-28.8 μg/kg,回收率为73.6%-86.1%;批内变异系数为4.3%-5.6%:批间变异系数为6.3%-7.6%:空白猪肌肉中CAP添加浓度为0.1 μg/kg、1 μg/kg和5 μg/kg时,检测范围为0.05μg/kg-6.4 μg/kg,回收率为76.4%-90.6%,批内变异系数为3.2%-5.6%,批间变异系数为6.9%-7.8%。与传统的ELISA检测方法进行对比试验,结果表明,两种方法的相关性较好。
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