【摘 要】
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目的:本研究旨在探讨妊娠早期胎盘绒毛甲状腺激素代谢与转运异常在自然流产（spontaneous abortion）发生中的作用,为自然流产患者病因提供理论依据。方法:选取2019年7月至2020年7月期间在安徽医科大学第一附属医院妇科门诊手术室拟行人工流产术的45名早孕妇女作为研究对象,包括自愿选择终止妊娠（elective terminations of pregnancy）20例命名为ETP组
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目的:本研究旨在探讨妊娠早期胎盘绒毛甲状腺激素代谢与转运异常在自然流产（spontaneous abortion）发生中的作用,为自然流产患者病因提供理论依据。方法:选取2019年7月至2020年7月期间在安徽医科大学第一附属医院妇科门诊手术室拟行人工流产术的45名早孕妇女作为研究对象,包括自愿选择终止妊娠（elective terminations of pregnancy）20例命名为ETP组和自然流产25例命名为SA组,分别收集ETP组和SA组人工流产术后的绒毛组织。比较ETP组与SA组在妊娠天数、年龄及甲状腺激素（TSH、T3、T4）水平等基本研究资料的差异。通过免疫组化实验分别检测每视野Ki67阳性细胞和TUNEL阳性细胞数和占总细胞的比例,从而比较两组胎盘绒毛滋养层细胞的增殖与凋亡情况。通过免疫组化实验分别检测每视野CD34阳性血管数、VEGF阳性细胞数量和阳性细胞率,从而比较两组胎盘绒毛中的血管生成情况。通过免疫组化实验和RT-PCR实验分别测定TTR蛋白质和m RNA水平上的表达量,从而比较两组胎盘绒毛中TTR的表达情况。为了比较ETP组和SA组胎盘绒毛中甲状腺激素的转运与代谢情况,分别检测两组甲状腺激素转运体（MCT8和OATP1A1）、脱碘酶（Dio2和Dio3）和甲状腺激素受体（THRα和THRβ）蛋白质和m RNA水平上的表达量。通过RT-PCR实验检测甲状腺激素转运体（MCT8和OATP1A1）、脱碘酶（Dio2和Dio3）和甲状腺激素受体（THRα和THRβ）m RNA水平上的表达量。为了进一步研究甲状腺激素受体（THRα和THRβ）在ETP组和SA组胎盘绒毛中的表达,通过免疫组化实验检测甲状腺激素受体（THRα和THRβ）蛋白质水平上的表达量。为了进一步研究Dio2在在ETP组和SA组胎盘绒毛中的表达,通过免疫荧光实验和Western Blot实验检测Dio2蛋白质水平上的表达量。结果:1.ETP组与SA组在妊娠天数、年龄及甲状腺激素（TSH、T3、T4）水平等基本研究资料上比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）,表明两组实验结果具有一定可比性。2.免疫组化实验结果显示,与ETP组相比,SA组每视野下胎盘绒毛Ki67阳性细胞数量和阳性细胞率明显降低（P＜0.01）,说明SA组胎盘绒毛滋养细胞增殖明显减少;与ETP组相比,SA组每视野下胎盘绒毛TUNEL阳性细胞数量和阳性细胞率明显增加（P＜0.01）,说明SA组胎盘绒毛滋养细胞凋亡明显增多。以上结果表明,SA患者胎盘绒毛滋养细胞增殖明显减少、凋亡明显增多。3.免疫组化实验结果显示,与ETP组相比,SA组每视野下胎盘绒毛CD34阳性血管数明显减少（P＜0.01）;与ETP组相比,SA组每视野下胎盘绒毛VEGF阳性细胞数量和阳性细胞率减少（P＜0.05）。以上结果表明,SA患者胎盘绒毛血管生成明显减少。4.免疫组化实验和RT-PCR实验结果显示,与ETP组相比,SA组胎盘绒毛TTR蛋白质水平上的表达量降低,同时TTR m RNA水平上的表达量降低（P＜0.05）。以上结果表明,SA患者胎盘绒毛TTR表达下调。5.在甲状腺激素转运体（MCT8和OATP1A1）方面:RT-PCR实验结果显示,与ETP组相比,SA组胎盘绒毛中甲状腺激素转运体（MCT8和OATP1A1）m RNA水平上的表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。在脱碘酶（Dio2和Dio3）方面:RT-PCR实验结果显示,与ETP组相比,SA组胎盘绒毛中脱碘酶（Dio2和Dio3）m RNA水平上的表达量显著下调（P＜0.01;P＜0.05）;免疫荧光实验结果显示,与ETP组相比,SA组胎盘绒毛中Dio2的荧光强度降低。Western Blot实验结果显示,与ETP组相比,SA组胎盘绒毛中Dio2蛋白质水平上的表达量显著下调（P＜0.01）。在甲状腺激素受体（THRα和THRβ）方面:RT-PCR实验结果显示,与ETP组相比,SA组胎盘绒毛中THRαm RNA水平上的表达量明显下降（P＜0.05）,而THRβm RNA水平上的表达量差异无统计学意义（P＞0.05）;免疫组化实验结果显示,与ETP组相比,SA组胎盘绒毛THRα蛋白质水平上的表达量降低（P＜0.05）,而THRβ蛋白质水平上的表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。以上结果表明,SA患者胎盘绒毛中参与甲状腺激素的转运与代谢的Dio2、Dio3、THRα表达下调,而MCT8、OATP1A1、THRβ未见明显变化。结论:妊娠早期胎盘绒毛甲状腺激素代谢与转运异常,引起胎盘滋养细胞增殖和凋亡紊乱、母胎界面血管生成异常,造成胎盘形成发育障碍,诱发与胎盘相关的不良妊娠结局的出现,如早期自然流产、子痫前期、IUGR等。
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