【摘 要】
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本文主要开展了一种新型的以壳聚糖为基质的非病毒基因载体的制备及对鼠成纤维细胞NIH3T3细胞转染机理的研究。首先，利用可逆加成-裂解链转移(RAFT)技术可控合成预定分子量的
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本文主要开展了一种新型的以壳聚糖为基质的非病毒基因载体的制备及对鼠成纤维细胞NIH3T3细胞转染机理的研究。首先，利用可逆加成-裂解链转移(RAFT)技术可控合成预定分子量的聚乙二醇甲基丙烯酸甲酯PMPEG活性单元，然后通过自由基偶联的方法将PMPEG接枝到烯丙基化地壳聚糖上，得到CS-PMPEG聚合物，最后将谷胱甘肽GSH连接到大分子PMPEG主链的末端，形成以PMPEG为间隔臂的新型谷胱甘肽/壳聚糖接枝共聚物CS-PMPEG-GSH。CS-PMPEG-GSH聚合物不仅能够压缩DNA，有效防止CS-PMPEG-GSH/DNA复合物纳米粒子自聚集，而且增强了复合物纳米粒子与NIH3T3细胞膜的有效结合能力，在细胞质谷胱甘肽10mM时，DNA能够快速从复合物纳米粒子中释放出来，从而提高了对NIH3T3细胞的转染效率。与单纯壳聚糖相比，CS-PMPEG-GSH的毒性降低，由于修饰过程中保留了大部分壳聚糖的氨基，因此CS-PMPEG-GSH保留了壳聚糖的阳离子聚电解质的性质，这些结果表明这一新型的非病毒基因载体在临床应用上有很大的潜力。
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