泰妙菌素（Tiamulin，TML）是一种截短侧耳素类动物专用抗生素，不仅对支原体有极强活性，而且对链球菌、金黄色葡萄球菌也有很强的抗菌活性，以较低剂量添加时能促进生长，因此作为兽药和饲料添加剂被广泛应用。但TML在动物性食品中的残留可能对人类的健康造成严重的潜在威胁。目前，用于检测泰妙菌素残留的方法主要是理化检测方法，存在样品处理过程繁琐，耗时较长，且需要昂贵的仪器等缺点。本研究根据TML的分子结构特点成功制备完全抗原并作鉴定；制备了TML多克隆抗体并初步建立了TML免疫学检测方法，为TML单克隆抗体的制备奠定了基础。1、完全抗原的制备与鉴定本研究用混合酸酐法（Mixed anhydride，MA）将半抗原泰妙菌素偶联至载体牛血清白蛋白（Bovine serum albumen，BSA）和卵清蛋白（Ovalbumin，OVA）制备了免疫抗原TML-BSA和包被抗原TML-OVA；对制备的免疫原做紫外扫描鉴定和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定，根据SDS-PAGE凝胶电泳图估算出完全抗原的偶联比。结果显示，抗原偶联成功，估算出的偶联比约为1:23.6。用TML-BSA免疫3只BALB/c小鼠，免疫剂量20μg，免疫间隔2周，免疫4次，用间接ELISA方法测定小鼠抗血清的效价和敏感性。结果显示，2号、3号小鼠效价均达到1:6400，3只小鼠的抗血清效价均能被TML标准品抑制，其中3号小鼠血清敏感性最好，IC50为559ng/mL。2、多克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立用完全抗原TML-BSA免疫雌性新西兰大白兔，免疫剂量300μg，免疫间隔2周，免疫4次，多抗血清经纯化后得到多克隆抗体并做免疫学特性鉴定。结果显示，多克隆抗体的效价达到1:1.28×105，IC50为200.04ng/mL，与泰乐菌素、罗红霉素等常见抗生素的交叉反应率均小于1%，具有良好的特异性。实验利用制备的多克隆抗体建立了TML间接竞争ELISA检测方法。该方法标准曲线线性关系良好，R2为0.9906，灵敏度达到181.28ng/mL。