【摘 要】
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目的:观察Pokemon沉默对人乳腺癌细胞RFC4表达的影响,并分析两者在临床表达中的相关性。方法:以体外培养的人乳腺癌MDA-MB-231、HS578T、MCF-7、T-47D四个细胞系为研究对象,
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目的:观察Pokemon沉默对人乳腺癌细胞RFC4表达的影响,并分析两者在临床表达中的相关性。方法:以体外培养的人乳腺癌MDA-MB-231、HS578T、MCF-7、T-47D四个细胞系为研究对象,按照Pokemon序列设计特异性si RNA,将si RNA瞬时转染至乳腺癌细胞内,通过q RT-PCR方法从m RNA转录水平研究沉默Pokemon对RFC4表达的影响,通过蛋白免疫印迹法从蛋白水平检测沉默Pokemon对RFC4表达的影响。应用组织芯片结合免疫组织化学染色法检测100例乳腺非特殊性浸润性导管癌组织中Pokemon与RFC4的表达情况,分析二者在临床表达中的相关性。结果:Pokemon沉默对乳腺癌细胞中RFC4的影响:采用si RNA瞬时转染沉默MDA-MB-231、HS578T、MCF-7、T-47D四个细胞系中的Pokemon表达后,RFC4的m RNA表达水平下调,说明沉默Pokemon能从m RNA转录水平上抑制RFC4的表达。采用si RNA瞬时转染沉默MDA-MB-231、HS578T、MCF-7、T-47D四个细胞系中的Pokemon后,RFC4的蛋白表达水平下调,说明沉默Pokemon能从蛋白水平上抑制RFC4的表达。Pokemon与RFC4在临床表达中的相关性:通过对100例人乳腺癌组织(非特殊性浸润性导管癌)进行免疫组化分析,结果显示Pokemon与RFC4表达存在着相关性,随着Pokemon的表达增加,RFC4的阳性表达率也增加,Pokemon的表达与RFC4的升高呈明显正相关,差异有统计学意义?结论:1)沉默Pokemon可抑制乳腺癌细胞RFC4的m RNA及蛋白表达水平。2)在乳腺癌组织中Pokemon与RFC4的表达呈正相关性。
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