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我国是食管癌高发国家之一，其发生率和死亡率都很高。肿瘤转移和复发是食管癌预后差的主要原因之一。近来，上皮细胞间质转化EMT在肿瘤转移中的作用成为研究的热点。TIP30/CC3基因是一个肿瘤转移抑制基因，前期研究发现TIP30作为抑癌基因，在肝癌、前列腺癌、乳腺癌、胃癌等恶性肿瘤中发挥抑制肿瘤生长和转移的作用。但TIP30在食管癌中尚无研究，且TIP30抑制转移的机制及其对EMT的影响有待进一步阐明。本课题以食管癌为模型阐明了TIP30抑制食管鳞癌浸润转移和EMT的作用及其相关分子机制。本课题共分为四个部分：一、TIP30抑制食管鳞癌转移的体内和体外研究分析11株食管鳞癌细胞系和1株食管正常上皮永生化细胞系中TIP30基因的表达水平；利用慢病毒为载体的RNA干扰技术（Lv-shTIP30）抑制TIP30基因的表达，同时构建了TIP30的慢病毒过表达系统（Lv-AcTIP30）增加TIP30的表达，然后通过软琼脂克隆形成实验、四甲基偶氮唑盐改良实验（MTS）、平板克隆形成实验以及裸鼠体内成瘤实验检测了TIP30表达对食管鳞癌生长的影响，通过Transwell迁移实验和划痕实验及裸鼠体内成瘤转移实验检测了TIP30表达对食管鳞癌转移能力的影响。实验结果：干扰TIP30基因的表达，食管鳞癌细胞的体外增殖、转移和侵袭能力增强，实验组裸鼠与对照组相比成瘤体积明显增大，肺转移灶增多；过表达TIP30基因后实验结果反之。二、TGF-β诱导TIP30启动子区甲基化沉默TIP30表达通过TGF-β刺激细胞诱导食管癌细胞发生EMT改变，利用RT-PCR和WesternBlot检测了TIP30和EMT指标的表达情况,通过MSP检测了TIP30的启动子区的甲基化程度；通过甲基化特异性PCR(methylation specific PCR, MSP)和RT-PCR检测了11株食管鳞癌细胞株和人正常食管上皮永生化细胞株TIP30启动子区甲基化状态和mRNA表达水平。实验结果：TGF-β能诱导食管癌细胞发生EMT改变，并伴随TIP30的启动子去甲基化程度增加及表达下调；11株食管鳞癌细胞系中有五株细胞系存在TIP30启动子区甲基化，且与TIP30的mRNA表达水平负相关，同时，BSP测序结果验证了TIP30的甲基化程度。三、TIP30通过抑制β-catenin活性阻滞EMT通过RT-PCR和免疫荧光染色技术检测EMT相关指标的改变；通过荧光素酶报告基因活性分析β-catenin转录活性，通过免疫荧光染色检测β-catenin胞内定位。实验结果：沉默TIP30表达能诱导食管癌细胞发生EMT；过表达TIP30能够阻滞TGF-β诱导的EMT；TIP30能通过改变β-catenin的胞内定位阻滞β-catenin的转录活性。四、TIP30在食道癌组织中的表达及甲基化状态利用免疫组织化学染色技术检测了100例食管鳞癌病例中TIP30的表达水平，并分析了其与各临床指标间的相关性；利用MSP检测了85例食管癌病例中TIP30的甲基化状态，分析了其与各项临床指标间的关系。实验结果：TIP30的表达水平与食管鳞癌患者的性别、肿瘤大小以及肿瘤分期有关。68/85（80%）病例中存在TIP30启动子去高甲基化，且TIP30的甲基化程度与肿瘤转移和复发相关。结论：在食管鳞癌中，肿瘤微环境中TGF-β能够诱导抑癌基因TIP30发生甲基化，导致其表达水平的下调；TIP30表达下调能通过激活β-catenin促进食管鳞癌增殖和转移能力和EMT进程；TIP30的甲基化和表达水平与食管鳞癌患者的转移和预后相关，有望成为食管癌的预后指标。