枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对刺参腐皮综合病致病菌的拮抗作用以及对水质的影响

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刺参(Apostichopus japonicus)属于棘皮动物门(Echinodermata)海参纲(Holothuroidea)楯手目(Aspidochirota)刺参科(Stichopodidae)仿刺参属(Apostichopus)。刺参含有丰富的胶原成分和蛋白聚糖,还含有大量的黏蛋白及多种氨基酸。最近有研究证明刺参含有防衰老的酸性粘多糖(硫酸软骨素),具有较广的抗肿瘤及抗凝血的作用,并具有增强机体免疫功能的作用。20世纪80年以来,刺参养殖业迅速发展,与此同时,养殖面积的迅速扩张以及集约化养殖方式下的不规范操作,养殖过程中相继出现一系列病害问题,给刺参养殖业带来了巨大的损失。刺参“腐皮综合病”因其高传染性、高死亡率成为刺参养殖病害研究的重点。其发病特征一般为:感染初期刺参口部先出现感染症状,表现为围口膜松弛,触手对外界刺激反应迟钝,继而出现排脏现象;感染中期刺参身体收缩、僵直,口腹部出现小面积溃疡,形成蓝白色小斑点,逐渐丧失摄食能力;感染末期刺参的病灶变大,溃疡处增多,表皮腐烂面积变大,最后导致刺参死亡,溶化成鼻涕状胶体。我们从养殖池内中分离得到一株菌Bs-1,通过测定Bs-1对C、N利用能力等30多项生理生化指标,结合表型特征,确定Bs-1为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。该菌生长迅速,通过PDB培养基的发酵培养,枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(Bs-1)能产生抗菌物质,该发酵液能抑制分离自刺参腐皮综合病病灶部位的致病菌C6、TB的生长;所产生的抗菌物质在一定范围内对热、酸碱、变性剂和蛋白酶K均有较好的稳定性。进一步尝试用Bs-1的含菌培养液来控制养殖海水中C6、TB的数量,结果表明每升海水中加入3-4ml培养液(浓度为1×108CFU·ml-1)已能达到较好的抑菌效果;应用Bs-1对养殖水体中各项水质因子进行控制和处理,实验接种菌液量为4、7、10ml(1×108CFU·ml-1)。结果表明:枯草芽孢杆菌能显著降低养殖试验池NH3-N,NO2--N, COD等污染物浓度。使用效果表明:在投加枯草芽孢杆菌菌液后,水质各项指标均优于未投加菌液的对照池,NH3-N,NO2-N, COD污染物的最高去除率分别是:94.5%,90.3%和68.3%,明显改善养殖水体水质条件,因此,Bs-1有望开发成良好的益生菌剂。
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