银屑病皮损TLRs的表达研究

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银屑病是一种在遗传易感背景下受多种环境因素影响的慢性炎症性皮肤病,为多因素复杂性疾病。近年来,在众多的危险因素中,感染引起国内外学者的广泛重视。研究显示,细菌和病毒感染与银屑病的发生发展密切相关。目前研究发现TLR家族中TLR2、TLR4和TLR9与病原微生物的感染关系密切,Toll样受体是一种模式识别受体(PRR),通过识别微生物病原体相关模式(PAMPs)来诱导非特异性免疫应答,介导相关疾病的发生发展。表皮是机体抵抗病原微生物感染的第一道屏障,主要由角质形成细胞构成,角质形成细胞不但维持表皮结构的完整性,而且能分泌多种具有生物活性的细胞因子,参与并反馈性调节皮肤免疫反应,在银屑病的发生发展中发挥了关键性的作用。角质形成细胞在病理上发生的改变是引起和维持银屑病大多数临床症状的主要原因。因此研究角质形成细胞是否表达TLRs以及TLRs是否介导了银屑病发病中细菌病毒感染诱发的免疫反应,是阐明银屑病的发生与感染相关的核心所在。本实验通过研究正常皮肤组织和银屑病患者皮损处角质形成细胞上的TLRs的表达,推论和探讨TLRs介导的感染诱发银屑病的机制。本研究共分为两部分。第一部分:采用免疫组织化学方法检测正常皮肤组织和银屑病患者皮损处角质形成细胞上的TLR2、TLR4和TLR9的表达。第二部分:采用流式细胞仪检测角质形成细胞上TLR2、TLR4和TLR9的表达。结果显示,正常皮肤组织角质形成细胞检测到TLR2、TLR4和TLR9的表达,其中TLR2主要表达在细胞膜上,表达呈弱阳性;TLR4表达更为微弱,几乎可以忽略不计;TLR9表达阳性,阳性细胞主要位于基底细胞层和棘细胞层下部。在银屑病患者皮损处角质形成细胞,TLR2、TLR4和TLR9均呈强阳性表达,其中TLR2阳性细胞主要位于棘细胞层上部;TLR4呈强阳性表达,棘细胞层上部表达最强,逐渐向基底层细胞减弱;TLR9阳性细胞主要位于基底细胞层和棘细胞层下部。另外,在银屑病患者皮损处真皮层内,单核细胞上可见TLR2、TLR4和TLR9的阳性表达,TLR2和TLR4阳性细胞散在分布;TLR9阳性细胞则聚集分布;血管内皮细胞上还可见到TLR9的阳性表达。流式细胞仪检测到了皮肤角质形成细胞上TLR2、TLR4和TLR9的表达。实验结论:在正常皮肤组织角质形成细胞TLR2、TLR4弱阳性表达,TLR4的表达更微弱,可以忽略不计。而角质形成细胞TLR9的表达阳性,主要在基底细胞层和棘细胞层下部。提示了角质形成细胞具有非特异性免疫功能;在银屑病皮损处角质形成细胞上TLR2、TLR4和TLR9的表达增强,其中TLR2、TLR4主要表达在表皮棘细胞层上部,TLR9表达在表皮基底细胞层和棘细胞层下部。提示了银屑病和细菌病毒感染密切相关,感染是诱发银屑病的重要因素之一,TLR2、TLR4和TLR9参与了银屑病的发生发展,在介导感染因素诱发银屑病的信号转导通路的过程中,TLRs发挥了关键性的作用;在银屑病皮损真皮内单核细胞上有TLR2、TLR4和TLR9的表达,血管内皮细胞上有TLR9的表达。提示这些细胞参与了银屑病的发生发展,非特异性免疫反应紊乱是银屑病的主要发病机制。
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