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研究背景抑郁症是一种常见的精神障碍性疾病,伴有不明原因的躯体疼痛。大量的临床数据表明抑郁和疼痛之间存在着高度的共病性,在临床上经常会遇到抑郁症合并慢性躯体疼痛的患者。疼痛和抑郁之间存在着复杂的互相促进关系。疼痛会影响抑郁的预后和治疗,反之亦然。疼痛的缓解与抑郁的改善相关,对疼痛症状的有效治疗已被证明可以提高抑郁症患者的缓解率。总之,抑郁症和慢性疼痛同时发生,与其中任何一种情况单独发生相比,疾病的预后更差,发生功能障碍持续的时间更长,对药物治疗的反应更差。因此抑郁合并慢性疼痛给个人和社会都带来了极大的负担。疼痛和抑郁存在共同的发病机制,这些共同的发病机制对促进抑郁和慢性疼痛的发生和发展至关重要。炎症机制在抑郁合并慢性疼痛的发病机制中发挥重要的作用,有文献表明,抑郁合并慢性疼痛与血清/血浆中促炎性细胞因子(包括白介素(Interleukin,IL-1)、IL-6、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor Alpha,TNF-α)水平升高有关,抑郁合并慢性疼痛的脑内促炎性细胞因子的表达上调。针刺作为一种操作简单、疗效确切、安全无创的治疗方式,前期研究表明针刺对于抑郁症以及慢性疼痛疗效显著,并有证据显示电针足三里穴以及经皮耳迷走神经刺激(Transcutaneous Auricular Vagus Nerve Stimulation,taVNS)可通过胆碱能抗炎通路实现抗炎作用。本研究选取慢性不可预知性温和刺激(Chronic Unpredictable Mild Stimulation,CUMS)结合坐骨神经慢性压迫(Chronic Constriction Injury of Sciatic Nerve,CCI)模型,采用 taVNS 和电针足三里作为干预方式,通过观察包括体重、糖水消耗量、旷场实验水平穿越格数和竖立次数、机械刺激缩足反应阈值、热刺激缩足延迟时间等指标来评价造模是否成功以及干预前后的疗效变化。通过观察taVNS和电针足三里后模型大鼠血浆TNF-α和P物质的变化特点,以及检测taVNS和电针足三里后模型大鼠前额叶皮层(Prefrontal Cortex,PFC)、海马、下丘脑、杏仁核中TNF-α的表达,以期探究针刺对抑郁合并慢性疼痛模型大鼠的胆碱能抗炎机制。目的探索经皮耳迷走神经刺激和电针足三里对抑郁合并慢性躯体疼痛模型大鼠的胆碱能抗炎机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、taVNS组、电针足三里(ST36)组,每组10只。除空白组外,其他三组均采用孤养,并进行CUMS结合CCI的造模方法,CUMS造模28天后进行CCI手术。以糖水消耗量、机械刺激缩足反应阈值、热刺激缩足延迟时间观察CUMS结合CCI模型造模是否成功。造模结束后,taVNS组采用taVNS干预,使用韩氏电针仪连接正负极自吸附导电磁铁,无创固定于大鼠双侧耳甲腔部进行电刺激;ST36组采用足三里穴电针干预,电针直刺双侧足三里穴5mm,足三里穴位于大鼠肱骨头下方5mm处。两组连续干预28天,刺激参数均为疏密波,2/15Hz,2mA。于造模前28天开始每两周测量一次各组大鼠的体重、旷场实验水平穿越格数和竖立次数、机械刺激缩足反应阈值、热刺激缩足延迟时间。于造模前28天、造模后0天、干预第28天分别测量一次各组大鼠的糖水消耗量。观察taVNS和电针足三里对CUMS结合CCI模型大鼠抑郁和疼痛样行为的改善。干预第24天,采用ELISA方法检测电针前、电针15分钟、电针后taVNS组和ST 36组大鼠血浆TNF-α和P物质的含量变化。于干预第28天取材,并使用ELISA方法检测四组大鼠血浆TNF-α和P物质的含量,采用Western blot方法检测四组大鼠PFC、海马、下丘脑、杏仁核中TNF-α表达。结果(1)体重:造模前14天和造模后0天,与空白组比较,模型组、taVNS组、ST 36组大鼠体重显著下降(P<0.001,P<0.01);干预第14天,与空白组比较,taVNS组和ST36组大鼠体重显著下降(P<0.05);干预第28天,与空白组比较,taVNS组大鼠体重显著下降(P<0.05);与模型组比较,taVNS组大鼠体重显著下降(P<0.05);与ST36组比较,taVNS组大鼠体重下降,但无统计学差异(P>0.05);(2)糖水偏好实验:造模后0天,与空白组比较,模型组、taVNS组、ST 36组大鼠糖水消耗量显著下降(P<0.05);干预第28天,与模型组比较,taVNS组大鼠糖水消耗量显著上升(P<0.05);与模型组比较,ST 36组大鼠糖水消耗量上升,但无统计学差异(P<0.05);与ST36组比较,taVNS组大鼠糖水消耗量上升,但无统计学差异(P>0.05);(3)旷场试验:造模前14天,与空白组比较,taVNS组、ST 36组大鼠水平穿越格数显著下降(P<0.05);造模后0天,模型组、taVNS组、ST36组大鼠水平穿越格数显著下降(P<0.01);造模前14天,与空白组比较,ST 36组大鼠竖立次数显著下降(P<0.05);造模后0天,模型组、ST36组大鼠竖立次数显著下降(P<0.05);干预第28天,taVNS组大鼠竖立次数显著下降(P<0.05);与ST36组比较,taVNS组大鼠水平穿越格数和竖立次数下降,但无统计学差异(P>0.05);(4)机械刺激缩足反应阈值:造模后0天,与空白组比较,模型组、taVNS组、ST36组大鼠机械刺激缩足反应阈值显著下降(P<0.001);干预第28天,与模型组比较,taVNS组和ST36组大鼠机械刺激缩足反应阈值上升,但无统计学差异(P>0.05);与taVNS组比较,ST36组大鼠机械刺激缩足反应阈值上升,但无统计学差异(P>0.05);(5)热刺激缩足延迟时间:造模后0天,与空白组比较,模型组、taVNS组、ST 36组大鼠热刺激缩足延迟时间显著下降(P<0.01,P<0.05);干预第28天,与空白组比较,模型组热刺激缩足延迟时间显著下降(P<0.01);与模型组比较,taVNS组、ST 36组热刺激缩足延迟时间显著上升(P<0.05);与taVNS组比较,ST 36组大鼠热刺激缩足延迟时间上升,但无统计学差异(P>0.05);(6)血浆TNF-α、P物质含量:与电针前比较,电针15分钟和电针后taVNS组、ST36组大鼠血浆TNF-α含量下降,但无统计学差异(P>0.05);干预第28天,与空白组比较,模型组大鼠血浆TNF-α含量显著上升(P<0.05);与模型组比较,ST36组大鼠血浆TNF-α含量显著下降(P<0.01);taVNS组大鼠血浆TNF-a含量下降,但无统计学差异(P>0.05);与taVNS组比较,ST36组大鼠血浆TNF-α含量下降,但无统计学差异(P>0.05);与电针前比较,电针15分钟和电针后taVNS组大鼠血浆P物质含量下降,但无统计学差异(P>0.05);电针15分钟ST36组大鼠血浆P物质含量下降,但无统计学差异(P>0.05);干预第28天时,与空白组比较,模型组大鼠血浆P物质含量下降,但无统计学差异(P>0.05);与模型组比较,ST36组大鼠血浆P物质含量升高,但无统计学差异(P>0.05);与taVNS组比较,ST 36组大鼠血浆P物质含量升高,但无统计学差异(P>0.05);(7)PFC、海马、下丘脑、杏仁核中TNF-α表达:干预第28天,与空白组比较,模型组大鼠海马、下丘脑、杏仁核中TNF-α表达量显著升高(P<0.05);模型组大鼠PFC中TNF-α表达量升高(P=0.058);与模型组比较,ST36组大鼠杏仁核中TNF-α表达量显著下降(P<0.05);taVNS组大鼠海马、下丘脑中TNF-α表达量下降(P=0.054,P=0.052);taVNS组大鼠PFC、杏仁核中TNF-α表达量下降,但无统计学差异(P>0.05);ST36组大鼠PFC、海马、下丘脑中TNF-α表达量下降,但无统计学差异(P>0.05);与taVNS组比较,ST36组大鼠PFC和杏仁核中TNF-α表达量下降,但无统计学差异(P>0.05);与ST36组比较,taVNS组海马和下丘脑中TNF-α表达量下降,但无统计学差异(P>0.05)。结论(1)连续28天孤养下的CUMS结合CCI模型可诱导出抑郁伴慢性躯体疼痛样行为;(2)连续28天taVNS和足三里电针均可改善大鼠抑郁伴慢性躯体疼痛样行为;(3)与空白组相比,抑郁合并慢性躯体疼痛模型大鼠血浆、PFC、海马、下丘脑、杏仁核中TNF-α水平升高,taVNS和电针足三里可下调TNF-α表达。