乌司他丁减轻创伤失血性休克大鼠肺炎性损伤的机制

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目的:探讨乌司他丁在醋酸钠林格液复苏基础上对创伤失血性休克大鼠肺炎性介质及其信号通路mi R-146a/TLR4/NF-κB的影响。方法:取72只SD大鼠,随机分为休克不复苏组(SR,n=24),醋酸钠林格液组(AR,n=24)及乌司他丁联合醋酸钠林格液组(UR,n=24)。通过股动脉放血将3组制成休克模型(平均动脉压维持在30~40 mm Hg),SR组休克制备成功后不予复苏,并分别于休克后1h、4h、6 h(若大鼠死亡,则大鼠死亡即刻)取大鼠的肺组织;AR组、UR组分别维持休克60 min后应用醋酸钠林格液、醋酸钠林格液联合乌司他丁进行30 min液体复苏,并分别于复苏后1h、4h、6 h取大鼠的肺组织。利用实时荧光定量PCR法检测各组肺组织中mi R-146a、TNF-α、IL-1、IL-4、IL-6、IL-10的m RNA含量;通过Western blot检测TLR4、My D88、IκB-α、p-IκB-α、NF-κB p65、IRAK4、p-IRAK4(Thr345、Ser346)、p-IRAK4(Thr342)、TRAF6的蛋白相对表达量;并在光镜下观察三组肺组织病理学变化。结果:1.大鼠的肺组织中m RNA表达水平:1h时,IL-4 m RNA的表达在三组中无明显差异(P>0.05),4h和6h中,IL-1 m RNA的表达在UR组与AR组中均无明显差异(P>0.05);其余在相同时间点UR组中mi R-146a和抑炎因子(IL-4、IL-10)的表达均高于AR组和SR组(P<0.05),AR组高于SR组(P<0.05),促炎因子(如TNF-α、IL-1、IL-6)的表达均低于AR组和SR组(P<0.05),且AR组低于SR组(P<0.05)。2.大鼠的肺组织中蛋白相对表达量:在相同时间点,UR组中IκB-α、p-IRAK4(Thr342)及p-IRAK4(Thr345、ser346)的蛋白表达均高于AR组和SR组(P<0.05),AR组高于SR组(P<0.05),TLR4、My D88、NF-κB p65、p-IκB-α、IRAK-4及TRAF6的蛋白表达均低于AR组和SR组(P<0.05),且AR组低于SR组(P<0.05)。3.肺组织病理学显示:在相同时间点,SR组的肺组织病理改变最为明显,AR次之,UR组较AR组和SR组的肺组织炎症均有明显改善,主要表现在肺泡腔结构较清晰,肺间质水肿减轻,炎性细胞渗出、浸润程度也较轻。结论:1.醋酸钠林格液可减轻创伤失血性休克大鼠肺组织病理改变,其机制可能是通过提高mi R-146a的表达,特异性作用于靶标IRAK-4和TRAF6,使IκB磷酸化降低,进而抑制TLR4/NF-κB信号通路的活化,减少促炎因子的产生,增加抑炎因子的释放,逆转炎症因子表达失衡。2.乌司他丁可在醋酸钠林格液复苏的基础上进一步减轻创伤失血性休克大鼠肺组织损伤,提示其可能在保护重要脏器方面有重要作用,为临床进一步研究提供了一定的基础和理论数据。
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