目的: 观察尼古丁对T淋巴细胞亚群CD4+细胞和CD8+细胞分化的影响，以及对CD4+细胞中Th1、Th2细胞分化的影响，为尼古丁对免疫系统的作用提供进一步的证据。方法:（1）20只6－8周的BALB/C雌性小鼠随机分为4组：对照组、1.5mg组、3.0 mg组和6.0 mg组。对照组小鼠腹部皮下注射生理盐水溶液，另三组分别按1.5mg/kg，3.0 mg/kg ，6.0 mg/kg注射尼古丁溶液，均连续注射3周；无菌取小鼠脾脏，不锈钢网制备脾细胞溶液，尼龙棉柱法分离T淋巴细胞；分别加入Thy-1-FITC抗体，CD4-FITC抗体和CD8-PE抗体，流式细胞仪检测并分析T细胞的分离率及CD4+细胞与CD8+细胞的比值；（2）使用Mouse Th1/Th2 Cytokine CBA试剂盒检测血浆样品中5种细胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ和TNF-α的浓度。（3）抽提T淋巴细胞总RNA，设计以上五种细胞因子的特异引物，RT-PCR法扩增特异片段，琼脂糖凝胶电泳并照相，凝胶分析系统分析结果。结果:（1）T淋巴细胞的分离率在78.53％－83.66％之间，即应用尼龙棉柱法分离T淋巴细胞可达到80％左右的分离率；对T淋巴细胞中CD4/CD8比例的测定结果显示，3个浓度组和对照组相比均有显著性差异，P<0.05，说明尼古丁影响T淋巴细胞CD4+和CD8+亚群的分化，使CD4/CD8比例降低，而且，高浓度尼古丁的作用更加显著。（2）经不同浓度尼古丁处理后，血浆中五种细胞因子的含量发生明显改变：IL-2和TNF-α浓度增加，IL-4和IL-5浓度降低。IFN-γ没有检测到。（3）RT-PCR结果显示，经不同浓度尼古丁处理后，T细胞内五种细胞因子的基因表达均受到不同程度的影响，IL-4、IL-5和TNF-α的基因表达下降，IL-2和IFN-γ基因表达增高。结论:小鼠经尼古丁处理后，CD4+细胞与CD8+细胞的比值下降，Th2细胞因子（IL-4、IL-5）的表达下降，Th1细胞因子(IL-2、IFN-γ)表达有增高趋势。因此，尼古丁可能影响T淋巴细胞CD4+和CD8+亚群的分化，使CD4/CD8比例降低；可能影响Th1,Th2细胞的平衡，主要是抑制Th2细胞，进而抑制体液免疫应答。