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目的房颤(Atrial fibrillation,AF)是一种临床上常见的心律失常,与心脏瓣膜病等多种心脏疾病的发生有关。心肌纤维化(Cardiac fibrosis)是房颤发生的病理生理基础,也是心肌重构的一个重要特征。长链非编码RNA(long non-coding RNAs,Lnc RNAs)是近年来的研究热点,在调控细胞生长和凋亡过程中起着重要作用,其发挥作用与micro RNAs有关。本课题以Lnc RNA GAS5为切入点,通过影响其表达检测下游靶基因和蛋白的表达,观察其对大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)的活化增殖的影响,探讨GAS5的可能作用机制。方法将所SD大鼠随机进行分组,分2组,各40只,标记心肌纤维化组为A,对照组标N。腹部皮下注射异丙肾上腺素构建大鼠心肌纤维化模型,对照组N组注射等量生理盐水,连续7天。HE和Masson染色观察大鼠心脏组织病理学改变和胶原改变,计算胶原容积分数(Collagen volume fraction,CVF),实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测GAS5和mi R-21表达变化。提取SD乳鼠心肌成纤维细胞,通过脂质体瞬时转染Lnc RNA GAS5过表达质粒(p EGFP-C1-GAS5)及其阴性对照和小干扰GAS5 si RNA及其阴性对照,48 h后收获细胞。采用q RT-PCR检测GAS5、mi R-21的表达,以及I型胶原前胶原(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的m RNA水平的表达,Western blot分析Col1A1、α-SMA和MMP-2蛋白表达变化,MTT法检测CFs增殖生长活力。结果与对照组N组比较,在心脏组织心肌纤维化A组,HE和Masson染色提示心肌细胞间质胶原沉积,纤维化形成,心肌胶原容积显著增多,q RT-PCR结果提示GAS5表达量较对照组N组明显下降,mi R-21表达升高。在转染了p EGFP-C1-GAS5和阴性对照p EGFP-C1的原代CFs中,q RT-PCR提示p EGFP-C1-GAS5过表达组GAS5的表达量较阴性对照组显著增多,mi R-21的表达下降,Col1A1和α-SMA的表达下调,MMP-2表达上调,Western blot法检测表现Col1A1和α-SMA的蛋白表达量下降,而MMP-2表达量升高,在CFs转染24 h、48 h后,p EGFP-C1-GAS5组的细胞增殖活力较空白对照组和阴性对照组明显减弱。在转染了GAS5 si RNA和其阴性对照的原代CFs中,q RT-PCR提示GAS5si RNA组GAS5的表达量较阴性对照组明显下降,mi R-21的表达升高,Col1A1和α-SMA的表达上升,MMP-2表达下降,Western blot法检测发现Col1A1和α-SMA的蛋白表达量增高,而MMP-2表达量减少,在CFs转染24 h、48 h后,GAS5 si RNA组的细胞增殖活力较空白对照组和阴性对照组明显活跃。结论ISO诱导的大鼠心肌纤维化模型中,GAS5表达量明显降低,mi R-21表达升高。在心肌成纤维细胞中,GAS5的高表达可以抑制mi R-21的表达,减少细胞外基质生成,而MMP-2表达增高。GAS5低表达的情况下,mi R-21明显升高,抑制MMP-2表达,Col1A1和α-SMA表达升高。这些说明GAS5可以作用与mi R-21起到抑制心肌纤维化发生,这为进一步探讨Lnc RNAs在心肌纤维化中的作用提供有力依据。