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目的:本研究通过体外实验来研究粉防己碱对人胰腺癌CFPAC-1和PANC-1细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并探讨其作用的分子机制。方法:首先,体外培养人胰腺癌CFPAC-1和PANC-1细胞,采用CCK-8实验和细胞克隆形成实验检测不同浓度粉防己碱对人胰腺癌细胞CFPAC-1和PANC-1增殖能力的影响;采用细胞划痕实验和Transwell实验来观察不同浓度粉防己碱对CFPAC-1和PANC-1细胞迁移及侵袭能力的影响;采用Western Blot分别检测粉防己碱对CFPAC-1和PANC-1细胞中EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin及其上游重要转录因子Twist,Snail1的表达水平的影响,并进一步分析粉防己碱对人胰腺癌细胞TGF-β/Smad通路中关键蛋白Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3表达水平变化,同时分别检测MAPK通路中ERK,p-ERK,P38,p-P38蛋白的表达情况。结果:1.不同浓度粉防己碱(0μM、5.0μM、10.0μM、20.0μM、40.0μM、60.0μM)对人胰腺癌细胞的增殖具有抑制作用,且这种作用具有时间依赖和剂量依赖的关系(p<0.05)。2.通过细胞划痕实验和Transwell实验发现粉防己碱可以抑制人胰腺癌细胞的迁移及侵袭,用粉防己碱(0μM、5μM、20μM)干预CFPAC-1细胞和PANC-1细胞24h后,细胞的迁移距离,和穿过的细胞数明显少于对照组,且具有浓度依赖性(p<0.05)。3.机制上,Western Blot结果显示人胰腺癌细胞CFPAC-1和PANC-1在粉防己碱(0μM、5μM、20μM)作用24h后,细胞的EMT相关蛋白及上游关键转录因子发生了变化,其中细胞的E-cadherin的表达水平发生了增加,N-cadherin、Vimentin、Snail1和Twist的表达水平均降低。同时调控EMT过程的TGF-β/Smad和MAPK信号传导通路中的关键蛋白也发生了变化,细胞中总的Smad2、Smad3、ERK,P38的表达水平没有较明显的变化,但p-Smad2、p-Smad3、p-ERK、p-P38的表达水平明显下降(p<0.05)。结论:粉防己碱能抑制人胰腺癌CFPAC-1和PANC-1细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT。粉防己碱通过影响TGF-β/Smad和MAPK信号通路关键蛋白的磷酸化水平发挥作用。因此,粉防己碱对人胰腺癌细胞的抑制作用可为胰腺癌的治疗提供新的思路。