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酚类和苯胺类化合物是重要的化工原料和中间体,活性艳蓝(Remazal Brilliant Blue R,简称RBBR)是一种蒽醌染料,它们在工业生产中都被广泛应用,并随着工业废水的排放进入水体、土壤中。由于它们化学性质比较稳定、残效期长、毒性高,被认为是环境中主要的有机污染物。它们的生物危害性及在自然环境中的迁移、转化与降解也一直是全世界研究的热点。本课题利用简青霉对几种酚类和苯胺类物质及活性艳蓝进行了降解研究,为难降解有机物的生物降解提供研究基础。并先后采用物理诱变和化学诱变的方法对简青霉进行了诱变研究,以期获得产漆酶较高的菌株。首先在培养4d的简青霉培养体系中,分别加入不同浓度的酚类和苯胺类物质,观察这些有毒物质对简青霉生长的影响,并研究简青霉对这几种有毒物质的降解效果。同时,对液体培养条件下简青霉产漆酶的能力进行了检测。结果表明：低浓度的酚类和苯胺类物质能促进简青霉的生长,高浓度的这些物质则对简青霉的生长有一定的抑制作用。简青霉对酚类和苯胺类物质的降解随时间的变化与简青霉的漆酶活性随时间变化在整体趋势上是一致的。同时简青霉能够很好地催化氧化苯酚,2,4-二氯苯酚和苯胺。当分别控制苯酚浓度为500μg·ml-1、2,4-二氯苯酚浓度为50μg·ml-1、苯胺的浓度为1000μg·ml-1时,简青霉对它们的降解率都接近100%。在2,4-二氯苯酚浓度为60-125μg·ml-1、苯胺浓度为2000-5000μg·ml-1时,简青霉对它们的降解率分别达到60%、65%以上。简青霉对对硝基苯酚和对硝基苯胺降解效果不明显,在研究的浓度范围内,简青霉对它们的降解率只在10%左右。其次针对简青霉在不同条件下对蒽醌染料RBBR的脱色情况进行了研究。分别以底物浓度、接种的菌液量、pH值、培养时间、温度作为单一变量,研究简青霉对于RBBR的脱色率。研究结果表明RBBR的脱色情况均较好,简青霉对于RBBR的脱色主要是生物吸附与生物降解。在振荡培养条件下,当RBBR浓度为60μg·ml-1,菌液接种量为4ml(107个/ml的悬浮液),pH为5.5,温度为37℃,菌龄为4d时,简青霉对RBBR的脱色率达到最大值96.96%。最后,为获得产漆酶较高的菌株,本课题对简青霉进行了诱变研究,先后对简青霉的原始菌株进行了化学诱变和紫外诱变,并经PDA-RBBR平板培养基对诱变后的菌株进行初筛,筛选出使平板褪色较好的诱变菌株再通过固体发酵培养,用ABTS法测漆酶产量,复筛出一株产漆酶能力较高的菌株C5E4。将诱变菌株C5E4传代培养并测定菌株的酶活。实验结果表明化学诱变的最佳诱变条件是将5ml的硫酸二乙酯(2%)与5ml孢子悬液反应30min,此时的诱变致死率达到75.46%；在距离30cm处15W的紫外灯照射4min的条件下,紫外诱变的致死率达到80%。经初筛、复筛,选出诱变后的菌株C5E4,其漆酶最高酶活达到4.80U·g-1,比原始菌株的最高酶活高28%。而且经过传代培养5代以后,C5E4产酶能力表现出较好的遗传稳定性。