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目的：探讨靶向HMGB1的shRNA对HMGB1表达改变的影响及其对子宫内膜癌HEC-1A细胞侵袭与迁移能力改变的影响。方法：运用RNA干扰技术,构建针对HMGB1基因的短发夹RNA (pshRNA-1/HMGB1、pshRNA-2/HMGB1、pshRNA-3/HMGB1),同时设置转染空白质粒的阴性对照组(HMGB1/p-NC)和脂质体转染组(Lipo组),用脂质体法转染人子宫内膜癌细胞(HEC-1A),利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western-Blot)检测转染后48h各组细胞HMGB1在mRNA水平和蛋白水平的表达,Transwell小室法观察转染HMGB1shRNA后HEC-1A细胞的侵袭情况,细胞划痕实验观察转染HMGB1shRNA后HEC-1A细胞的迁移情况。结果：1、RT-PCR结果显示：针对HMGB1构建的三组重组质粒HMGB1-pshRNAs(1、2、3)转染后,HMGB1mRNA相对表达水平分别是0.192±0.006,0.055±0.002和0.123±0.004,均较Lipo组(0.268±0.008)和阴性对照组(0.270±0.004)明显减少(P<0.05)；与阴性对照组比较,分别减少了28.9%,79.6%和54.4%。2、Western-blot结果显示：针对HMGB1构建的三组重组质粒HMGB1-pshRNAs(1、2、3)转染后,HMGB1蛋白相对表达水平分别是0.259±0.013,0.032±0.002和0.104±0.007,均较Lipo组(0.347±0.007)和阴性对照组组(0.349±0.007)明显减少(P<0.05)；与阴性对照组比较,分别减少了25.8%,90.8%和70.2%。3、Transwell小室法检测细胞的侵袭能力显示：转染后48h,pshRNA2转染组穿膜细胞为(20±1)个,阴性对照组和Lipo组穿膜细胞数分别为(36±1)和(36±2)个。与阴性对照组比较,pshRNA2转染组穿膜细胞数明显减少(P<0.05),差异有统计学意义；而Lipo组和HMGB1/p-NC组穿膜细胞数差异无统计学意义(P>0.05)4、细胞划痕实验检测细胞迁移能力显示：划痕后培养48h,pshRNA2转染组细胞的迁移率为25.75%±1.70%,脂质体转染组细胞的迁移率为65.25%±1.70%,阴性对照组细胞的迁移率为64.75%±4.57%。与阴性对照组相比,pshRNA2转染组细胞迁移率明显降低(P<0.05)；而脂质体转染组和阴性对照组的细胞迁移率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：1、靶向干扰HMGB1的三组重组质粒在人子宫内膜癌细胞中均能有效下调HMGB1在mRNA和蛋白水平的表达,其中以pshRNA-2/HMGB1沉默效果最好。2、靶向干扰HMGB1的shRNA2转染子宫内膜癌细胞HEC-1A后细胞的侵袭与迁移能力明显下降,提示HMGB1可能参与子宫内膜癌侵袭与迁移的发展过程。