不同番茄抗病基因型和温度对TYLCV复制的影响

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随着全球气候变暖,各国间贸易活动的加强以及烟粉虱介体在世界各地的空前扩展,由烟粉虱传播的番茄黄化曲叶病在世界范围内大面积爆发,该病造成番茄品质下降,商品价值丧失,产量减少,甚至绝收,已成为世界番茄生产的主要限制因素。研究发现,选育抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的番茄新品种是减轻番茄黄化曲叶病毒病的最有效方法。对不同番茄基因型和温度对TYLCV复制的影响进行系统研究,有助于明确不同温度下不同抗病基因对病毒的抑制作用,为进一步研究不同抗病基因的抗病机制,合理组合不同番茄抗病基因,培育高抗TYLCV的番茄新品种奠定基础。目前国内外在番茄黄化曲叶病毒的抗源筛选等方面做了大量工作。育种者对野生番茄抗TYLCV的筛选结果表明:在醋栗番茄、秘鲁番茄、智利番茄、多毛番茄及契斯曼尼番茄中均存在抗病基因,抗病基因主要有Ty1、Ty2、Ty3、Ty4和Ty5,这些基因在番茄抗TYLCV中发挥主要作用。为了深入研究不同抗病基因的抗病性,本试验选择含有Ty1、Ty2、Ty3的番茄品种作为试验材料,用我国主流TYLCV株系TYLCV-IL[CN:SH2]进行接种,研究了温室条件下和人工控温条件下不同番茄基因型对TYLCV复制的影响。主要研究结果如下:1.利用TAS-ELISA检测法对感病番茄植株中的TYLCV进行相对定量分析,发现植株顶部叶片病毒含量与萼片、花瓣、雄蕊中的病毒含量相当,叶片可以作为TYLCV定量检测的理想材料。2.以构建的侵染克隆TYLCV-IL[CN:SH2]作为标准样品,根据TYLCV的DNA保守序列设计引物,基于SYBR Green I检测模式,构建了TYLCV实时荧光定量PCR检测体系。该荧光定量检测方法比常规PCR灵敏度高100倍,可以检测感病番茄植株和烟粉虱中的微量病毒,对于研究植株各部分的TYLCV含量,病毒在植株中的运输,不同基因型对该TYLCV株系的抑制作用等研究奠定基础。3.通过研究不同番茄基因型对TYLCV复制的影响,发现Ty2基因对该TYLCV株系的抑制作用明显强于Ty1和Ty3,并且这三个基因之间在对该TYLCV株系的抑制方面不存在加性效应,并且,即使不含任何主效抗病基因的番茄植株中TYLCV复制情况也不相同,因此除这些主效基因外,番茄植株中还存在一些微效基因对TYLCV的复制起作用,并且这些微效基因的抗病性不仅仅针对该TYLCV株系。4.随着温度升高,含Ty1和Ty3的番茄植株中病毒复制加快,但番茄植株不表现黄化曲叶症状,因此Ty1和Ty3可能存在其他抗病机制,可以通过研究转录组学等方法对它们的抗病机制进行深入研究。
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