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目的:花粉症是由风媒花粉引起且主要累及呼吸道和眼部的常见的Ⅰ型变态反应,具有明显的季节性和区域性,其发病率逐年增加,严重影响人们身体健康,加重社会经济负担。在中国北方地区由蒿属花粉引起的花粉症尤为突出,因此在现有的蒿属花粉研究的基础上,明确蒿属植物种属鉴定,进一步深入分析蒿属变应原的免疫活性,对于中国北部地区花粉症诊治具有重要价值。方法:本研究通过花粉症问卷调查、变应原筛查、实地花粉和血清采集,利用现有的核酸序列数据库,通过ITS序列分析及形态学进行蒿种鉴定。通过基因合成技术合成野艾蒿花粉变应原基因Art la 1至Art la 6。构建本氏烟草植物、毕赤酵母和大肠杆菌蛋白表达载体,转化宿主重组表达变应原,并进行金属镍离子配体亲和层析纯化。最后用SDS-PAGE电泳分析、c-myc标签抗体及艾蒿过敏患者血清的Western Blotting检测验证各重组变应原的重组表达与lgE结合活性。结果:(1)中国北部航空兵部队花粉症患病率39.15%(449/1147),SPT和血清slgE检测结果显示艾蒿阳性率最高,航空兵部队阳性检出率高达33.24%和48.84%;(2)ITS序列及形态学鉴定5种蒿属样本,分别为野艾蒿Artemisia lavandulifolia(KX421740)、大籽蒿Artemisia sieversiana(KX421708)、黄花蒿Artemisia annua(KX421777)、艾Artemisia argy i(JX051681)和猪毛蒿Artemisia scoparia(KX421761),相似性分别为99.74%、99.79%、100%、99.30%和100%,其中野艾蒿最常见;(3)本氏烟草瞬时表达纯化出野艾蒿变应原Art la 1和Art la 2,荧光体式显微镜观察到叶片发出绿色荧光;(4)甲醇诱导毕赤酵母重组表达纯化的变应原Art la 3经SDS-PAGE分析有少量低纯度蛋白,Art la 6无蛋白;(5)大肠杆菌重组表达纯化的变应原Art la 4和Art la 5经SDS-PAGE分析高效表达;(6)c-myc标签的Western Blotting检测验证重组蛋白的表达,结果显示变应原Art la 1、Art la 2、Art la 3、和Art la 4均为c-myc标签抗体结合阳性,变应原Art la 5和Art la 6阴性;(7)60例艾蒿过敏患者血清的Western Blotting检测结果显示重组变应原Art la 1、Art la 2、Art la 3和Art la 4与血清lgE结合的阳性率分别是55.0%、31.7%、30.0%和33.4%。结论:中国北部地区花粉症患病率高达39.15%,主要于夏秋季发病,野艾蒿是主要致敏源之一。在本氏烟草、毕赤酵母和大肠杆菌中,成功重组表达野艾蒿花粉4种主要变应原并纯化,分别为Art la 1、Art la 2、Art la 3.0102和Art la 4,且与血清IgE具有免疫结合活性,为诊断试剂制备和变应原免疫治疗奠定了基础。