【摘 要】
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研究背景:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是消化内科疾病中发病率最高的恶性肿瘤性疾病,近年来其发病年龄越来越趋于年轻化,且发病率逐年稳步上升[1]。其中结直肠腺癌是其最常见的病理学类型。临床研究和动物实验已经证明了炎症信号通路在结肠炎相关结直肠癌的发病机制中起着关键作用。结直肠癌(colorectal cancer,CRC)相关炎症信号通路主要有NF-κB信号通路,IL-6/
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研究背景:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是消化内科疾病中发病率最高的恶性肿瘤性疾病,近年来其发病年龄越来越趋于年轻化,且发病率逐年稳步上升[1]。其中结直肠腺癌是其最常见的病理学类型。临床研究和动物实验已经证明了炎症信号通路在结肠炎相关结直肠癌的发病机制中起着关键作用。结直肠癌(colorectal cancer,CRC)相关炎症信号通路主要有NF-κB信号通路,IL-6/STAT3信号通路,COX-2/PGE2信号通路,IL-23/Th17信号通路等。越来越多的研究表明中医药干预结直肠癌具有一定的效果,也有越来越多的中草药应用于结直肠癌的研究。槲皮素和表儿茶素是存在于多种水果和中药中的多酚类物质,具有抗氧化、抗炎及抗肿瘤功效。且文献报道,槲皮素和表儿茶素有良好的协同抗氧化作用[14-16]。目的:本论文旨在通过构造结直肠炎和结直肠癌的动物模型,探讨槲皮素及表儿茶素在预防肠道炎症向炎症相关性结直肠癌(colitis-associated colorectal cancer,CAC)发展的过程中的作用及其可能存在的分子机制。方法:(1)通过致癌剂AOM联合致炎剂DSS的方法建立炎症相关性结直肠癌的动物模型,同时每天定时记录小鼠的饮食情况、体重变化及大便情况(有无腹泻及血便)。(2)槲皮素及表儿茶素对炎症相关性结直肠癌的预防作用:将50只SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照组,结肠癌模型组,槲皮素组,表儿茶素组,槲皮素联合表儿茶素组,共5组,在第一轮DSS过后,槲皮素组给予槲皮素35 mg/kg药物灌胃,表儿茶素组给予表儿茶素40 mg/kg药物灌胃,槲皮素联合表儿茶素组给予槲皮素35 mg/kg及表儿茶素40 mg/kg药物灌胃,对照组和结肠癌模型组给予生理盐水灌胃。(3)造模结束后处死小鼠,解剖并测量各组小鼠结直肠,做HE染色观察光镜下的组织细胞情况。(4)应用PCR技术检测各组小鼠结直肠组织中部分炎症相关基因TLR4、IL-1b、IL-6、IL-17的m RNA水平,部分内质网应激相关基因CHOP、ATF4、Xbp1s的m RNA水平,部分肿瘤相关基因MYC、PDGF、VEGF的m RNA水平。(5)应用蛋白质印迹法(Western Blot,WB)检测各组小鼠结直肠组织中p-STAT3的磷酸化水平。结果:(1)与正常对照组相比,结肠癌模型组的炎症相关基因TLR4、IL-1b、IL-6、IL-17的m RNA水平明显升高,且与结肠癌模型组相比,槲皮素组、表儿茶素组及槲皮素联合表儿茶素组的炎症相关基因TLR4、IL-1b、IL-6、IL-17的m RNA水平明显降低.(2)与正常对照组相比,结肠癌模型组的肿瘤相关基因MYC、PDGF、VEGF的m RNA水平明显升高,且与结肠癌模型组相比,槲皮素组,表儿茶素组及槲皮素联合表儿茶素组的肿瘤相关基因MYC、PDGF、VEGF的m RNA水平明显降低。(3)与正常对照组相比,结肠癌模型组的肿瘤相关基因CHOP、ATF4、Xbp1s的m RNA水平明显升高,且与结肠癌模型组相比,槲皮素组,表儿茶素组及槲皮素联合表儿茶素组的肿瘤相关基因CHOP、ATF4、Xbp1s的m RNA水平明显降低。(4)STAT3磷酸化水平在结直肠癌模型组表达明显升高,在槲皮素组,表儿茶素组及槲皮素联合表儿茶素组的表达明显降低。结论:槲皮素联合表儿茶素通过抑制STAT3对炎症相关性结直肠癌发挥干预作用。
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