三氮脒滴眼液减轻内毒素诱导的葡萄膜炎

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目的:我们前期研究发现给小鼠腹腔注射三氮脒溶液可以通过激活眼内血管紧张素转化酶2的活性减轻葡萄膜炎。本实验研究局部应用三氮脒滴眼液的抑炎效果并探讨NF-κB和p38 MAPK是否参与其抑炎效果的调控。方法:将6-8周SD大鼠54只随机分成6组,即:空白对照组、模型组、0.025%三氮脒给药组、0.05%三氮脒给药组、0.1%三氮脒给药组、0.1%地塞米松组给药组。每两个小时滴眼一次,每次10μ1,每天滴眼6次连续两天。第一天最后一次给药后在大鼠皮下注射200μg的内毒素诱导葡萄膜炎。注射内毒素24小时后行裂隙灯照相和临床评分。抽取房水,分离虹膜睫状体复合物。BCA蛋白定量试剂盒定量房水蛋白。用ELISA试剂盒检测房水中TNF-α,IL-6蛋白浓度。Real-timePCR检测虹膜睫状体复合物中炎症因子IL-1β,TNF-α,iNOS, COX-2以及NF-κB p65的表达。Western Blot检测虹膜睫状体复合物中NF-κBp65和磷酸化的p38 MAPK蛋白量。用CDllb对空白对照组、模型组、0.1%三氮脒给药组、0.1%地塞米松给药组中虹膜睫状体中炎症细胞进行染色。结果:0.05%,0.1%三氮脒组和地塞米松组均能明显降低葡萄膜炎临床评分与房水蛋白浓度。0.1%三氮脒可以减少房水中TNF-α, IL-6炎症蛋白的表达,同时抑制虹膜睫状体复合物中炎症因子IL-1p,TNF-α,iNOS,COX-2以及NF-κB p65 (p<0.01)的mRNA表达,以及NF-κB p65,磷酸化的p38 MAPK蛋白的表达。免疫组化发现0.1%三氮脒可以减少虹膜睫状体中CD11b阳性炎症细胞的数量。结论:三氮脒滴眼液能减轻内毒素诱导的葡萄膜炎,其效果与浓度相关。0.1%三氮脒组的抑炎效果比0.1%地塞米松组略差。三氮脒可能通过抑制NF-κB p65的表达和p38 MAPK蛋白的磷酸化,来下调炎症因子IL-1β,TNF-α,iNOS,COX-2的释放,进而抑制炎症的发生。
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