高效液相色谱法分析并半制备党参化学成分的方法学探索

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本文探索性的研究了使用高效液相色谱法分析并半制备党参化学成分的方法,除了对其组成成分进行了初步分析外,还制备得到了两个组分段和两种怀疑为单体的成分。全文包含六个实验,实验一是对仪器性能及操作稳定性的评价,包括精密度和重复性两个方面的测定,结果二者均小于5%,表明实验条件能满足需要;实验二是对党参乙醇提取物的初步分析,采用党参75%乙醇提取物为样品,乙腈-水梯度洗脱,仅是有紫外吸收的色谱峰就有三百五十九个,结果说明中药党参中还有许多传统分离提纯方法难以获得的未知成分;实验三是用大孔树脂对党参75%乙醇提取物进行分段制备,装好大孔树脂柱后上样,先用水洗脱除去其中强极性的多糖等成分,然后根据梯度洗脱的结果将其分别用30%、50%、80%乙醇洗脱分段,实验四则是对以上三段的HPLC分析;实验五是对其中大孔树脂80%乙醇洗脱这一分段中四个成分段的制备及制备后此几个成分段的峰纯度分析,根据实验四的分析结果,大孔树脂80%乙醇洗脱这一分段中的四个成分易于制备,用HPLC在线制备这四个组分,并用制备条件进行分析,结果表明其中有二个成分可能是单体;实验六是对制备出的成分进行初步的定量,通过定量计算,用此种方法制备出的成分完全可以满足实验室需要,经过二十到三十次进样,所得成分可以满足细胞药效学实验。通过对以上各个实验结果的分析可以确认:分离、提纯单体的传统方法在一步步的分离、提取过程中造成了许多成分的遗漏;本论文中所采用的大孔树脂分段后直接用液相色谱进行分析半制备的方法可以尽量减少分离过程中成分的遗漏,并且也可得到高纯度成分。本文所探索的用高效液相色谱法分析并半制备党参化学成分的方法具有可行性,并且可以为我们探明中药效应物质基础提供方法学的支持,也为我们探索中药作用机制提供了新的研究思路。但是,由于本实验只是一个方法学的探索,因而对其中一些定量问题没有深入涉及,另外,对于制备出的成分没有作质谱、核磁等鉴定,所得成分究竟是否为单体、是什么成分还有待进一步研究。
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