【摘 要】
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目的:本研究旨在探讨土木香内酯增强阿帕替尼对食管鳞癌细胞系TE-1和ECA-109细胞抗肿瘤作用及其机制。方法:利用CCK8法检测不同浓度土木香内酯和阿帕替尼对TE-1和ECA-109细胞增殖的影响;再将TE-1和ECA-109细胞分为对照组（Con组）、土木香内酯组（Ala组）、阿帕替尼组（Apa组）、阿帕替尼联合土木香内酯组（Apa+Ala组）。利用集落形成实验观察细胞增殖能力;划痕修复实验和
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目的:本研究旨在探讨土木香内酯增强阿帕替尼对食管鳞癌细胞系TE-1和ECA-109细胞抗肿瘤作用及其机制。方法:利用CCK8法检测不同浓度土木香内酯和阿帕替尼对TE-1和ECA-109细胞增殖的影响;再将TE-1和ECA-109细胞分为对照组（Con组）、土木香内酯组（Ala组）、阿帕替尼组（Apa组）、阿帕替尼联合土木香内酯组（Apa+Ala组）。利用集落形成实验观察细胞增殖能力;划痕修复实验和Transwell实验观察细胞迁移、侵袭能力;Hoechst33342染液法荧光镜下观察凋亡细胞;Western Blot法检测增殖相关蛋白C-MYC,细胞凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、PARP以及检测相关通路蛋白VEGFR2/STAT3/BCL-2的表达;此外,我们通过建立人食管鳞状细胞癌ECA-109细胞裸鼠移植瘤模型,进一步探讨土木香内酯在体内增强阿帕替尼抗肿瘤的作用。结果:1、CCK8结果显示阿帕替尼呈剂量依赖性地抑制TE-1和ECA-109细胞的增殖。土木香内酯浓度大于3umol/L时,土木香内酯以剂量依赖的方式抑制TE-1和ECA-109细胞增殖。我们分别选用3umol/L的土木香内酯和30umol/L阿帕替尼作用于TE-1细胞,3umol/L的土木香内酯和20umol/L阿帕替尼作用于ECA-109细胞。Apa组细胞存活率均低于Con组,而联合组细胞存活率显著低于Apa组。集落形成实验结果示Apa组的集落数少于Con组;而联合组集落数明显少于Apa组。2、划痕修复实验结果显示,Apa组抑制TE-1和ECA-109细胞的迁移。联合组相比与Apa组,表现出更显著的抑制作用。Transwell结果示Apa组的TE-1和ECA-109透膜细胞数较Con组减少,与Apa组相比,联合组显示出更低的透膜细胞数。3、Hoechst33342染色结果示联合组核碎裂和浓缩的细胞比例明显增加。4、Western blot方法示Apa组迁移相关蛋白MMP-9、抗凋亡蛋白BCL-2、总PARP的显著下调,促凋亡蛋白BAX显著上调。联合组中的这种变化最为明显。5、裸鼠异种移植肿瘤模型结果显示,土木香内酯在体内增强阿帕替尼对异种移植肿瘤生长抑制作用。结论:土木香内酯增强阿帕替尼对食管鳞癌细胞的抗肿瘤作用,其机制可能与抑制VEGFR2/STAT3/BCL-2信号通路相关。
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