萝卜四倍体的诱导及离体再生体系的建立

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萝卜(Raphanus sativus L.)属十字花科萝卜属一、二年生草本植物,是一种以肉质根为主要食用部分的重要蔬菜作物。为了对萝卜进行种质资源创新并以此选育新品种,本试验对萝卜进行四倍体诱导并尝试建立其离体再生体系,结果如下所示。生长点滴注法以秋水仙碱、氨磺灵和氟乐灵为多倍体诱导剂,连续三天上、下午对萝卜幼苗生长点进行滴注,诱导潍县青和满堂红成为四倍体萝卜。浸种法则以0.1%和0.2%的秋水仙碱浸泡刚露白的种子6h和12h,以此对潍县青萝卜种子进行四倍体诱导。结果表明:生长点滴注法中,氨磺灵诱导萝卜四倍体的最佳浓度为0.002%~0.004%,氟乐灵诱导的最佳浓度为0.02%,二者的诱导变异率均能达到20%左右;浸种法中,以0.1%秋水仙碱浸泡种子6h诱导效果最佳,诱导后种子发芽率为70%,诱导变异率达到47%。通过形态学、细胞学鉴定,与二倍体植株相比四倍体植株生长明显缓慢,叶片增厚,叶色加深,花器官明显增大;四倍体植株叶片下表皮气孔增大,纵、横径较二倍体增加,密度较二倍体减少;对四倍体植株进行花粉母细胞染色体计数,观察到四倍体染色体数为2n=4x=36。营养风味品质测定结果表明:除粗纤维和干物质之外,四倍体植株的营养品质指标均比二倍体显著提高;而风味品质中,四倍体的异硫氰酸酯等主要风味物质的含量均高于二倍体。本试验选用8种不同基因型的萝卜为试验材料,进行了带柄子叶离体培养。结果表明:诱导不定芽的最佳培养基为MS培养基+30 g·L-1蔗糖+0.7%琼脂+5 mg·L–1 6-BA+0.05mg·L–1 NAA,诱导不定根的最佳培养基为MS培养基+30 g·L-1蔗糖+0.7%琼脂+5 mg·L–16-BA+0.1 mg·L–1 NAA;本试验利用这两种培养基配方通过离体培养四倍体带柄子叶成功再生出了四倍体植株。
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